单抗药物用宿主细胞蛋白（HCP）残留检测桥接验证

湖州申科生物CHO-K1 HCP 残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法）基于固相酶联免疫吸附分析法，适用于基于CHO-K1细胞生产的生物制品中宿主残留蛋白的定量检测。该分析方法通过在预包被抗CHO-K1HCPs绵羊多抗的酶标板中加入校准品或待测样品、HRP标记的抗CHO-K1HCPs绵羊多抗进行共孵育。洗涤后，加入TMB底物进行显色反应，再使用终止液终止酶催化反应。利用酶标仪在450nm波长下测读吸光度，其吸光度与校准品或待测样品中的HCPs浓度成正相关，通过校准品拟合的剂量-反应曲线即可计算得出待测样品中HCPs的浓度。本试剂盒对待测样品无需进行特殊处理，只需通过合适的稀释比例进行适用性验证即可直接使用。本试剂盒操作步骤少，快速，检测专一性强，性能稳定可靠。

宿主细胞蛋白（HCP）作为生物制品中来源于细胞基质的残留杂质，具有明显的异质性特征。其复杂性体现在三个方面：①理化特性差异：HCP涵盖胞内及分泌蛋白，涉及关键生理功能，具有涵盖区间大的等电点（pI 3-11）、分子量范围（5-250kDa）及疏水性；②上游工艺影响：不同发酵工艺（如细胞株、培养条件）诱导独特的翻译后修饰（PTM），导致HCP总量与生化复杂性增加；③下游工艺与产物特性干扰：抗体、细胞因子等重组蛋白或病毒类药物的纯化工艺会选择性残留特定HCP，且产物形式（如大肠杆菌的包涵体/可溶性表达）直接影响HCP残留谱。针对特定生产工艺开发定制化检测方案是准确监控宿主细胞蛋白残留的关键。

湖州申科生物致力于提供符合严格法规要求的宿主细胞蛋白（HCP）ELISA检测试剂盒。为确保产品满足生物制品（如抗体药、疫苗）申报（如IND/BLA）的监管标准，申科构建了全流程依规开发的质量体系：整个开发过程严格遵循ISO 13485质量标准，并满足用户审计要求。其开发流程明确包含三个关键阶段：①HCP残留定量检测参考品开发：关键在于建立可靠的HCP抗原参考品，涵盖抗原的表征、量值溯源与赋值、均一性和稳定性考察等，确保检测的准确性与代表性。②高质量大批量抗体制备：通过优化的HCP抗原动物免疫策略，结合严谨的抗体质量标准（如建立标准、覆盖率验证）和稳定的制备工艺，生产具有高特异性和广覆盖度的检测抗体，保证检测的特异性和灵敏度。③检测体系开发及验证：进行严谨的检测体系开发与验证工作，其验证方案符合ICH指导原则及药典关于分析方法验证的标准要求。同时，严格执行物料质控，并在洁净车间环境中进行生产，确保试剂盒方法的稳健性、重现性与法规符合性。这一从抗原源头到成品体系的标准化、合规化开发流程，是湖州申科HCP检测产品品质与可靠性的根本保障。

湖州申科生物依托高分辨质谱技术推出宿主细胞蛋白定制化检测服务组合，覆盖生物制品残留蛋白分析需求。该平台提供四类服务：HCP蛋白检测定制化服务；通过ELISA、双向电泳（2D）及LC-MS/MS技术，支持常规生物制品检测、高危及工艺相关蛋白数据库构建以及特殊生物制品分析；抗体覆盖率服务采用自主研发的IMBS技术结合质谱，准确评估ELISA试剂盒对工程细胞HCP的捕获能力，并完成校准品表征；靶向HCP检测专注于高风险残留蛋白的方法开发；同时提供蛋白种属鉴定服务，利用LC-MS技术溯源样品中的物种特异性肽段。该服务体系通过多技术联用与深度定制化策略，满足从基础筛查到工艺关键杂质监控的全维度需求。

MDCK（Madin-Darby Canine Kidney，马丁达比犬肾上皮细胞）细胞系是一种来源于犬肾的长久性细胞系，其被普遍用作流感病毒增殖与纯化、流感疫苗生产等过程中的细胞基质。基于其易感性、高产高滴度、无适应性突变、易驯化等优势，MDCK细胞成为公认的适合于流感病毒毒株分离和流感疫苗生产的细胞系。与其他产品杂质一样，MDCK宿主残留蛋白（HCP）可能对生物制品的安全性和有效性产生不利影响，因此在生产监测、产品放行等过程中需要对其进行定量研究并进行严格控制。SHENTEK^® MDCK HCP残留检测试剂盒（一步酶联免疫吸附法）是湖州申科生物自主研发的、具有完全自主知识产权的、实现关键试剂全国产化的MDCK HCP通用检测试剂盒。本试剂盒适用于基于MDCK细胞基质的病毒增殖及纯化、疫苗生产等过程中MDCK宿主残留蛋白的定量检测。本试剂盒操作步骤少，快速，检测专一性强，性能稳定可靠。

为什么定制化试剂盒是宿主细胞蛋白残留检测的优先选择？原因之一是来源特定工艺下抗原及校准品更具代表性。不同生物制品的上游生产工艺，包括培养基，培养条件，收获时机等差异，均会导致产生的HCPs的蛋白种类、丰度以及蛋白翻译修饰不同，因此进入到下游纯化工艺的HCP类型也随之发生变化，尤其是与药物主成分共纯化的HCPs会成为优势蛋白而存在于药物原液或制剂中。HCP定制化ELISA检测试剂盒通常选取实际生产工艺中上游发酵后的样品进行抗原及校准品的制备，所制备的校准品可以较为充分地反映实际生产工艺中的HCP，减少因抗原校准品种类不足导致的漏检以及定量不准确的风险。