HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释：对细胞的保护作用降低细胞毒性：某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性，影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性，从而保护细胞免受损伤。形成保护层：HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面，形成一层保护层，减少细胞间的摩擦和碰撞，降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。
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注意事项浓度控制：根据实验需求和细胞类型，严格控制HEPES的浓度。一般来说，培养液内含20mmol/L HEPES即可达到良好的缓冲效果。pH调节：在配制含有HEPES的培养基时，需要准确调节pH值至适合细胞生长的范围内。储存条件：配制好的含有HEPES的培养基应存放在适当的温度下，避免长时间暴露于空气中或受到污染。综上所述，HEPES缓冲体系具有***的缓冲范围、CO2无关性、低毒性、稳定性强和膜不透性等优势，在细胞培养和其他生物化学研究中发挥着重要作用。通过合理控制HEPES的浓度和配制方法，可以维持细胞培养环境的pH稳定，提高细胞的生长和代谢效率。云南cas号7365-45-9HEPES使用注意事项注射用HEPESCDE已登记。
HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养，尤其在CO2培养箱外操作时（如显微镜观察），可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM，过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感，需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定，防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中，HEPES需严格过滤除菌，且浓度不超过15 mM，以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养，其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。
与温度变化的稳定性HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%，优于Tris缓冲液。但高温（>50℃）会导致降解，需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力，适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中，HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液，其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中，HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子，影响依赖金属离子的RNA酶活性。注射用HEPESCDE已登记登记状态为A。
HEPES的化学结构与基本特性HEPES是一种两性离子缓冲剂，化学式为C8H18N2O4S，分子量238.3 g/mol。其结构由哌嗪环和乙磺酸基团组成，pKa值为7.5（25℃），在pH 6.8-8.2范围内具有优异的缓冲能力。作为Good's缓冲液家族成员，HEPES对细胞无毒性，且不与金属离子螯合，适合含金属离子的实验体系。其水溶性（>1 M）和低渗透压特性使其成为细胞培养的理想选择。HEPES的缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%，优于Tris缓冲液。但高温（>50℃）会导致降解，需避免高压灭菌。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物，需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌，并检测过氧化物含量（如硫代硫酸钠滴定法）。注射用HEPESCDE已登记；浙江高纯HEPES生产厂家
注射用HEPESCDE已登记登记状态为A；广西cas号7365-45-9HEPES
使用羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲体系时的注意事项由于哌嗪基团的存在，当羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光线中时，会产生H2O2，这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性，同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用，因此羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化领域常见的使用浓度为10-25mM，当浓度低于10mM时缓冲能力较弱，不能起到较好的缓冲效果，当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保护剂与缓冲盐，GMP条件生产，中美双报，供注射用，**内***，DNase&RNasefree，符合国际主流药典标准，助力重组蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物等生物制剂生产与中外申报！广西cas号7365-45-9HEPES
