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无血清细胞冻存液使用方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4）加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃以下冰箱，长期冷冻保存。在细胞内外进行双重保护，较大提高了细胞复苏存活率。青岛无血清细胞冻存液服务电话

无血清细胞冻存液：冻存注意：开盖之前，用70%的乙醇或异丙醇擦拭瓶身。以下说明适用于在6孔板内的培养物的冻存。培养物应该在适合传代的时候进行收集和冻存。每管所含有的细胞应当来源于6孔板的1个培养孔。如果使用其他的培养器皿，请相应的调整体积。1.在室温（15-25°C）以300xg离心5分钟。2.轻轻吸走上清液，注意不要扰动细胞团。3.用血清学吸管以1mL的TBD-698重悬细胞。在打散细胞团时，尽量减少细胞聚集体分解。4.用2mL的血清学吸管将1mL的细胞聚集体转移到标记好的冻存管中。5.用以下方法冻存细胞聚集体:推荐使用缓速降温方法，每分钟降低1度，随后可以在-196°C液氮长期保存。不推荐在-80°C长期保存。逐步降温法：-20°C保存2个小时，然后-80°C中保存2个小时，随后可以在-196°C液氮中长期保存。开封正规无血清细胞冻存液产品介绍无血清细胞冻存液产品性能：不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染。

细胞冻存液是如何保护细胞的：细胞这一微小的生命体和地球的其它生命相似，机体的主要成份是由液态的H2O组成，但是其结构微小复杂，内部任何的物理损伤对于它都是致命的。水在低于零度的条件下会结冰。如果将细胞悬浮在纯水中，随着温度的降低，细胞内外的水份都会结冰，所形成的冰晶会造成细胞膜和细胞器的破坏而引起细胞死亡，这种因细胞内部结冰而导致的细胞损伤称为细胞内冰晶的损伤。如果将细胞悬浮在溶液中，随着温度的降低，细胞外部的水分会首先结冰，从而使得未结冰的溶液中电解质浓度升高。如果将细胞暴露在这样高溶质的溶液中且时间过长，细胞膜上脂质分子会受到损坏，细胞便发生渗漏，在复温时，大量水分会因此进入细胞内，造成细胞死亡。这种因保存溶液中溶质浓度升高而导致的细胞损伤称为溶质损伤或称溶液损伤。

细胞冻存秘籍：细胞冻存对于大多数动物细胞，通常每分钟下降-1至-3℃。控制冷却过程的较好方法是使用程序降温系统。如果没有程序降温系统，可以使用程序降温盒，然后将其置于-70℃至-90℃冰箱中过夜。虽然这种方法适用于许多细胞系，但不能提供可控的，均匀的或可重复的冷却，不建议用于珍贵细胞。无论使用哪种冷却方法，重要的是快速高效地将其传输到较终存储位置。如果转移不能立即完成，可以将小瓶置于干冰上一段时间。这样可以避免在转移过程中发生温度升高而损害细胞。在这个转移过程中温度升高是解冻后影响细胞活力的主要原因。无血清冻存液用途：无血清细胞冻存液用于免疫细胞及干细胞的存储。

细胞冻存的注意事项：1、各种细胞对冻存速度的要求也不一样；上皮细胞和成纤维细胞耐受性可能大些，骨髓干细胞－2~－3℃/分钟合适；胚胎细胞耐受性较小，不宜太快。总之在一开始时，下降速度不能超过－10℃/分钟。2、用什么防护剂合适和用量多大，要依细胞而定，初代培养细胞用DMSO较好，一般细胞可用甘油；用量以较小为好。有人认为人皮肤上皮细胞贮存在20%-30%甘油中很好。3、原则上细胞在液氮中可贮存多年，但为妥善起见，冻存一年后，应再复苏培养一次，然后再继续冻存。4、将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作，以免冻坏。5、注意自身的安全，对于来自人源性或病毒传染的细胞株应特别小心。操作过程中，应避免引起气溶胶的产生，小心有毒性试剂例如DMSO，并避免尖锐物品伤人等。无血清细胞冻存液存储条件：推荐将产品分装成小管后，再存放于4℃以下或-20℃冰箱冻存。徐州正规无血清细胞冻存液供应商

细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法。青岛无血清细胞冻存液服务电话

细胞冻存液的原理及配制方法：细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中，及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是必不可少的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等等导致实验失败，如果没有原始细胞的冻存，则因为上述的意外而前功尽弃。青岛无血清细胞冻存液服务电话