重庆无血清细胞冻存液厂家现货

细胞冻存的注意事项：1.为保持细胞较大存活率，一般都采用慢冻存融的方法。2.冻存物距液氮面越近温度越低。标准的低冻速度为－1℃~12℃/分钟，当温度下降达－25℃时，下降速度可增至－5~－10℃/分钟，到－100℃时则可迅速冻入液氮中。因此要适当掌握冻存物下降入液氮中的速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促冰晶形成。3.初次冻存者在下降冻存时，宜先用细木棒伸入罐中探测液面位置，然后需用温度计与冻存物并行的办法，以观测下降冻存物的速度、冻存物与液氮液面距离和温度三者关系，当已掌握以上各参数和冻存技术熟练后，光按下降时间和下降距离便可获理想冻存效果。无血清细胞冻存液产品性能：传统的冻存液，一般由胎牛血清、DMSO等组分组成。重庆无血清细胞冻存液厂家现货

冻存方式：按照冻存保护液在冻结后是否形成冰晶来划分，冻存方法可分为非玻璃化和玻璃化冻存两种。非玻璃化冻存是利用各种温级的冰箱分阶段降温至-70℃～-80℃，然后直接投入液氮进行保存；或者是利用电子计算机程控降温仪以及利用液氮的气、液，按一定的降温速率从室温降至-100℃以下，再直接投入液氮保存的方法。以该种方法冻结的细胞悬液或多或少都有冰晶的形成。玻璃化冻存则是指利用多种高浓度的冷冻保护剂联合形成的玻璃化冷冻保护液保护悬浮细胞，直接投入液氮进行冻存的方法。以该中方法冻结的细胞悬液没有冰晶的形成。但目前细胞冻存较常用的仍是前一种方法。金华武汉无血清细胞冻存液无血清细胞冻存液产品特色：不含动物源成分，病毒、霉菌和支原体等污染可能性低。

无血清细胞冻存液使用方法：选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1）按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2）按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。（参考：5×105至5×106cells/ml）。3）取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量，置于离心管中，离心收集培养细胞（参考离心条件：1,000~2,000rpm，4℃，3~5min）。移去离心管中的上清液。4）加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀，制成细胞混合液。5）将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6）直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃以下冰箱，长期冷冻保存。

产品特性：a.可直接放置于-80℃冰箱，无需降温，节省时间和精力；b.即用型，无需现配，操作方便，可减少实验中因操作引起的污染；c.在多种哺乳细胞系中经过性能验证，其复苏率和活率达90%以上；d.可长期存储于-80℃冰箱(5年以上)，取用方便；e.采用成分明确的无血清配方，价格比常规自配细胞冻存液更为低廉；保存温度：2~8℃具体操作步骤：1、培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化，或分离获得原代细胞后，收集于离心管中。2、使用离心机离心，去除上清，收集细胞沉淀。3、根据细胞生长密度加入适量的细胞冻存液进行重悬，充分混匀(推荐冻存密度为1-2×106/ml)。4、将细胞悬液分装至冻存管中，直接放置于-80℃冰箱保存。24小时后可移入液氮长期保存(可选)。待冻存管中细胞混合液完全融化后，立即加入1 ml细胞培养基于该冷冻管中与细胞混合。

无血清细胞冻存液与含血清细胞冻存液对比：细胞冻存是细胞培养技术中细胞进行保种并长期保存的常用方法，其中细胞冻存液，作为细胞冻存时必须使用的一种溶液，不光光是说只是用来进行细胞的保存，在细胞的购买、寄赠、交换和运送过程中也起着关键作用，因此选择一款好的细胞冻存液就尤为重要。如果不加任何条件直接冻存细胞，细胞内和外环境中的水都会形成冰晶，能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、pH值改变、蛋白变性等，从而引起细胞死亡。而细胞冻存液就相当于细胞的保护剂，在冻存细胞时将细胞悬浮于冻存液中，可使冰点降低，提高细胞膜对水的通透性，在缓慢的冻结条件下，能使细胞内水份在冻结前透出细胞，可以防止或减少冷冻冰晶对细胞的损伤作用。这样就使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，在需要时直接复苏就可恢复细胞活性。无血清细胞冻存液：冻存细胞，无需程序降温。金华武汉无血清细胞冻存液

无血清冻存液特性：适合各种动物细胞。重庆无血清细胞冻存液厂家现货

使用方法：1)细胞超净台无菌环境，1.5mlEP管内加入细胞混悬剂均匀混悬细胞，细胞终浓度为5×106个/ml，混悬液体积为200μl。细胞冻存剂冰水混合物中预冷，逐滴加入细胞冻存剂800μl，细胞混悬剂与细胞冻存剂的体积比控制在1:4。2)开启程序性降温，降温速率为1℃/min，较后降温至-80℃以下进行冻存。将比较例1冻存后细胞的复苏率与实施例5冻存后细胞的复苏率进行对比，具体结果如附图1所示，可见采用本发明的冻存方法能够明显提高细胞的复苏率。其他实施例通过与比较例1进行比较，也得到相同的试验结果。本发明的冻存方法不仅可以明显提高冻存后细胞复苏率，同时还可减少不同批次细胞冻存复苏率不稳定、以及避免由血清中的支原体，细菌，朊细菌及其他细菌颗粒引发的污染。重庆无血清细胞冻存液厂家现货