无血清快速细胞冻存液,通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。产品特色:1.高安全性,完全使用医药品等级原料进行生产,不含动物成分,病毒、霉菌和支原体等污染可能性低,各批产品之间有更高的产品质量一致性。2.细胞存活率高,无批次差异。3.完全冻存液配方,可直接使用,方便简捷,可直接存放于-80℃冰箱冻存,无需经过费时的程序降温过程(省时、省力、省钱)。根据冻存方式不同可以分为慢速冻存(程序降温法)与快速冻存(非程序降温法)。珠海正规无血清细胞冻存液厂家
细胞冻存的操作步骤:1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;2.取对数生长期的细胞,去除旧培养液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入适量胰蛋白酶(覆盖培养皿表面)把单层生长的细胞消化下来;4.离心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的较终密度为5×106/ml~1×107/ml;6.将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5ml;7.在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;8.冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。珠海无血清细胞冻存液平均价格无血清细胞冻存液产品性能:通常细胞冻存液的配方是由胎牛血清加上DMSO组成。
细胞冻存注意事项:1、细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15m培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。2、复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。3、加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞冻存,我们应该注意哪些事项:1、液氮内的细胞冻存较长时间不要超过半年,冻存在液氮中的细胞应一段时间内进行更替。一个细胞系在培养一个月后,可复苏一管新的细胞确保其质量没有发生太大变化,传代几次后,再冻存留种。2、细胞复苏时,为保证获得较高的存活率和接种率,应尽可能的快速完成复苏,以避免在升温过程中细胞内部晶体的产生。书面介绍的复苏温度是37℃-42℃,但是本人在实际操作中发现40℃环境下复苏效果较好。3.复苏时使用的培养基和冻存时使用的培养基中的血清尽量保证同一批次。一些保护剂,易于穿透细胞,避免细胞内部水分子形成冰晶损伤细胞。
无血清细胞冻存液使用方法:选择冻存处于对数生长期的细胞有助于提高复苏细胞存活率。1)按照常用方法收集悬浮细胞或贴壁细胞于试管中。2)按照培养细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存细胞数。(参考:5×105至5×106cells/ml)。3)取相当于所需细胞数的细胞悬浮液量,置于离心管中,离心收集培养细胞(参考离心条件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min)。移去离心管中的上清液。4)加入适量的无血清型细胞冻存液于离心管中,使细胞浓度为5×105至5×106cells/ml。缓慢地混合均匀,制成细胞混合液。5)将离心管中的细胞混合液分装于已标示完全的冷冻保存管中。6)直接将含细胞混合液的冻存管放入-80℃以下冰箱,长期冷冻保存。无血清细胞冻存液存储条件:为避免重复冻融过程可能导致的冻存液品质下降和性能降低。南京无血清细胞冻存液直销价
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细胞冻存经验谈:选对冻存培养基才是王道:研究人员经常需要冷冻细胞并保存,以供后续实验或临床使用。基本过程相当简单:慢慢冷冻细胞,将冻存管放入液氮中,并在需要时快速解冻。冻存培养基能支持细胞并防止冰晶形成。不过,Malfavon的体验告诉我们,使用不同的冻存培养基,结果那可是大不同。一些经验老道的研究人员自己制备冻存培养基。不过,那些面对脆弱细胞(比如原代和多能细胞)的研究人员,则更喜欢购买标准化的商业产品。一些非常敏感的细胞系也许能从添加物中受益,以避免细胞在解冻时凋亡。珠海正规无血清细胞冻存液厂家
冻存细胞注意事项:冻存细胞系以备将来之用时,必须遵守以下原则。我们建议您严格遵守您所用细胞系附带的操作说明,以便获得较佳结果。在细胞处于生长期密度达到70-90%的情况下进行培养细胞的冻存,并且细胞传代尽可能靠前。确保冻存前活细胞百分比至少为90%。请注意较佳冻存条件取决于所用细胞系。细胞应缓慢冷冻,可使用可控制降温速度的低温冰箱或者低温冷冻容器,使温度每分钟大约降低1°C。必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有DMSO或者甘油等冷冻保护剂无血清细胞冻存液产品性能:胎牛血清取自牛,因此,难以应用到需要避免接触动物源的应用领域。无锡正规无血清细胞冻存液厂家推荐细胞冻存是细胞保存的主要方法之...