江西体外诊断均相发光免疫分析

外泌体等细胞外囊泡（EVs）是疾病诊断的潜在生物标志物来源。其分离和表征通常繁琐。均相化学发光技术提供了快速分析方案。利用EVs表面普遍或特异性表达的膜蛋白（如CD9、CD63、CD81或相关抗原），将针对不同蛋白的抗体分别偶联Alpha供体珠和受体珠。当EVs存在时，多个抗体结合到同一个EV上，拉近微珠产光信号，从而实现EVs的定量。通过使用不同抗体组合，还可以对EVs进行亚群分型分析。这种方法无需超速离心，操作简单，有望用于临床样本的快速筛查。均相化学发光对检测环境有什么特殊要求？江西体外诊断均相发光免疫分析

适配体是通过SELEX技术筛选得到的单链DNA或RNA分子，能高亲和力、高特异性结合靶标。将适配体与均相发光技术结合，产生了新型生物传感器。例如，可以设计一个分子信标式适配体：其两端分别标记荧光供体和淬灭基团，在没有靶标时结构闭合，FRET发生，信号淬灭；结合靶标后构象打开，荧光恢复。或者，将适配体与发光酶（如荧光素酶）融合，靶标结合引起构象变化，从而活化或抑制酶活性。这类均相适配体传感器在生物小分子、离子甚至细胞检测中展现出巨大潜力。广东浦光生物均相发光POCT市场新机遇，浦光干式均相化学发光助您把握未来！

Alpha技术，又称均相临近化学发光检测，是均相发光领域的一项变革性突破。该技术基于两种特殊的微珠：供体珠（Donor Bead）和受体珠（Acceptor Bead）。供体珠内包裹了光敏剂，当被680nm激光激发时，可将周围环境中的氧气转化为高能态的单线态氧。单线态氧在溶液中扩散距离极短（约200纳米）。只有当供体珠和受体珠因同时结合到一个目标分子（如抗原、蛋白互作对）上而彼此靠近时，单线态氧才能有效扩散至受体珠，触发其内部的化学发光剂产生520-620nm的强光。若两珠未靠近，单线态氧则淬灭在溶剂中。Alpha技术结合了临近诱导的高特异性和化学发光的高灵敏度，且不受样本颜色淬灭影响，在蛋白-蛋白相互作用、激酶活性、GPCR功能等研究中成为金标准。

荧光共振能量转移（FRET）是均相发光技术中应用比较多方面的信号产生机制之一。其原理是：当一个荧光基团（供体，Donor）的发射光谱与另一个荧光基团或淬灭基团（受体，Acceptor）的吸收光谱有足够重叠，且两者距离非常接近（通常1-10纳米）时，供体的激发态能量会以非辐射方式转移给受体。在均相检测中，常将供体和受体分别标记在相互作用的生物分子对（如一对抗体、或酶与底物肽）上。当目标分子存在并促使这对生物分子结合时，供体与受体被拉近，发生有效的FRET，导致供体荧光淬灭，受体荧光增强（如果受体是荧光团）。通过监测供体与受体荧光强度的比率变化，即可高灵敏度、高特异性地定量目标分析物。均相化学发光的反应机制是怎样的，有哪些关键步骤？

评估疫苗免疫效果或康复者血清中和能力的关键是病毒中和抗体检测。传统的空斑减少中和试验（PRNT）耗时费力。基于假病毒系统的均相发光中和试验已成为高通量替代方案。将表达荧光素酶的报告基因包装进假病毒颗粒（携带目标病毒的囊膜蛋白）。当假病毒炎症细胞时，会驱动荧光素酶表达。如果样本中存在中和抗体，则会阻断炎症，导致荧光素酶信号下降。检测时只需在炎症后裂解细胞并加入发光底物，即可实现快速、定量、高通量的中和抗体滴度测定，在COVID-19等疫病中发挥了重要作用。精确检测，一步到位！均相化学发光，助您轻松获得可靠结果！安徽CRET技术均相发光解决方案

均相化学发光与荧光免疫技术相比，优势在哪？江西体外诊断均相发光免疫分析

GPCR是比较大的药物靶点家族，其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验，可采用TR-FRET，将受体标记供体，配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生，均有成熟的均相检测试剂盒。例如，cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后，内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测，信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行，快速、灵敏，完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。江西体外诊断均相发光免疫分析