山东浦光生物均相发光免疫分析

GPCR是比较大的药物靶点家族，其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验，可采用TR-FRET，将受体标记供体，配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生，均有成熟的均相检测试剂盒。例如，cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后，内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测，信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行，快速、灵敏，完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。均相化学发光在疾病早期筛查中能发挥怎样的作用？山东浦光生物均相发光免疫分析

相较于荧光或比色法，化学发光作为均相检测的信号系统具有多重独特优势。首先，它无需外部激发光源，从而完全避免了光源不稳定、样本自发荧光及光散射所带来的背景干扰，理论上能获得极高的信噪比和灵敏度。其次，化学发光反应产生的光子信号强度在一定范围内与反应物浓度直接相关，动态范围宽，可跨越数个数量级。再者，化学发光体系（如鲁米诺、吖啶酯）的反应动力学多样，可满足从快速闪光到持久辉光的不同检测需求。比较后，化学发光反应的启动通常由单一试剂（如过氧化氢、碱）触发，易于控制，非常适合自动化仪器上的顺序注射和即时读数。这些特性使其成为实现超灵敏、高稳健性均相检测的理想信号输出模式。北京化学发光均相发光临床检验医学中的应用研究均相化学发光，国家重点实验室检测平台，领航医疗新时代！

在分子诊断领域，均相发光技术的应用远不止于基础的实时荧光定量PCR（qPCR）。它正推动该领域向着更高灵敏度、更强特异性和更便捷的操作模式演进。例如，在数字PCR（dPCR）这一定量技术中，虽然目前主流依赖荧光检测，但基于化学发光的均相检测方案正在探索中。其设想是将PCR反应体系分割成数万个微滴后，利用化学发光探针（如基于鲁米诺或吖啶酯的体系）进行检测：在扩增阳性微滴中，探针被切割或构象改变触发化学发光反应，通过计数发光的微滴数目即可实现核酸分子的定量。这种方法可能免除对复杂激发光学系统的依赖，并有望利用某些化学发光体系更高的信噪比特性，进一步提升对极低丰度靶标的检出能力。

外泌体等细胞外囊泡（EVs）是疾病诊断的潜在生物标志物来源。其分离和表征通常繁琐。均相化学发光技术提供了快速分析方案。利用EVs表面普遍或特异性表达的膜蛋白（如CD9、CD63、CD81或相关抗原），将针对不同蛋白的抗体分别偶联Alpha供体珠和受体珠。当EVs存在时，多个抗体结合到同一个EV上，拉近微珠产光信号，从而实现EVs的定量。通过使用不同抗体组合，还可以对EVs进行亚群分型分析。这种方法无需超速离心，操作简单，有望用于临床样本的快速筛查。告别磁珠反应，均相化学发光，操作更简便，实验效率大幅提升！

尽管优势明显，均相发光技术也存在一些挑战和局限性。首先，某些技术（如FRET）可能受到样本自身颜色（如血红蛋白）、浊度或某些化合物（如具有强荧光或淬灭特性的药物）的光学干扰。其次，均相检测通常对试剂的特异性和纯度要求极高，任何非特异性结合或聚集都可能导致假阳性信号。第三，开发均相检测方法需要进行复杂的探针设计和标记优化，前期开发成本较高。比较后，对于某些极低丰度的靶标，其灵敏度有时可能仍低于经过多步洗涤和信号放大的异相方法（如化学发光免疫分析CLIA）。均相化学发光在个性化医疗中的应用潜力有多大？江苏体外诊断均相发光解决方案

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在重症炎症（如脓毒症）、CAR-T诊疗或某些自身免疫病中，细胞因子风暴是危及生命的状态，需要快速监测多种炎症因子。基于微球阵列的均相化学发光多重检测技术，能够从单份微量血清或血浆样本中，同时定量检测IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ等十几种关键细胞因子的浓度。这种高通量、多参数的分析能力，使得临床医生或研究人员能够多方面、快速地掌握患者的炎症风暴谱系，评估严重程度，并监测诊疗干预（如抗细胞因子抗体）的效果，为精细免疫调控提供依据。山东浦光生物均相发光免疫分析