武汉正规鼠尾胶原厂家

鼠尾胶原是一种天然培养基，它具有促进体外培养细胞（特别是上皮细胞）贴壁的作用，同时它也是一种天然的黏附剂，当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬 片时，可在瓶底涂一层胶原，再放上小玻片，自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通 过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法，以及如何切割小玻片，并利用鼠尾胶原将其固定于 培养瓶内。 实验设备及材料： 大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理 盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容： 1、制备鼠尾胶原。 2、切割小玻片。 3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同。武汉正规鼠尾胶原厂家

一种生物医用鼠尾胶原蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤: 1.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节pH = 6.5，用的3?6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀； 2.用0.03?0.06mol/L的柠檬酸再次溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液，冰水浴中，调节PH = 6.5 ;溶液依次通过阳离子交换树脂、阴离子交换树脂进行脱盐处理；3.将脱盐后的胶原蛋白溶液，-40至-20°C预冻2?4小时，然后真空冷冻干燥，冻干产品经进一步处理得到含水率在3%以下的胶原蛋白微粉，灭菌、包装，得到成品胶原蛋白粉末。开封正规鼠尾胶原厂家胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网，它会牢牢地留住就要流失的钙质。

鼠尾胶原蛋白的提取方法：1.将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理，收集上清液；在冰水浴中，用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀2.用0.03〜0.06mol/L的柠檬酸溶液溶解沉淀物，成透明澄清黏稠溶液；在冰水浴中，调节pH = 6.5，用的3〜6mol/L的NaCl溶液缓慢加入上清液中，不断搅拌至溶液中白色的絮状物不再析出，4°C沉淀10小时，去除上清液，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。

鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上，pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L 乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06X 体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。需要的溶液 ( 均需要 无菌 、 预冷 ): 10xPBS( 可含10 mg/L的酚红用于 pH 指示 )或 10x 培养液 , 0.1mol/L NaOH, 0.1mol/L 乙酸(一般不用), 双蒸水不含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：将200ul生友鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入 690ul H2O。然后加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100ul 10xPBS或10x培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。鼠尾胶原蛋白的用途很普遍，可用于化妆品，工业和食品生产等领域。

鼠尾胶原蛋白等实验技术应用：干细胞、血管内皮细胞等多种「难伺候」的细胞，以及一些组织在体外培养时，需要在模拟体内环境的细胞外基质中生长，胶原蛋白和纤粘蛋白正是细胞外基质的主要组成部分，富含 1 型胶原蛋白大鼠尾部也成了实验室用胶原蛋白的较主要来源。鼠尾取血剪下几毫米小鼠尾巴、在小鼠尾静脉上划一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到这种鲜红的。它可以用于监测小鼠血液成分的变化，确认小鼠是否患上了 糖尿病或者某些治好能够改变小鼠的血糖等。比起心脏和眼部取血，实验用鼠尾尖取血的取血量较小，但取血之后，小鼠还能继续下一步建模或者实验，完全没有性命之忧。I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体。杭州鼠尾胶原厂家

当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬片时，可在瓶底涂一层胶原。武汉正规鼠尾胶原厂家

鼠尾胶原蛋白I型，用那一种胶原酶可以溶解：1．将胶原加入到0.1M 的醋酸中，制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2．建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中，并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3．稀释一定数量的胶原溶液。 4．按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5．从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的，这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。武汉正规鼠尾胶原厂家

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