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外泌体是一种存在于细胞外的多囊泡体，可通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成多泡内涵体，内涵体与细胞膜融合后释放其中的小囊泡。外泌体的直径在40-110nm之间，其中包含RNA、蛋白质、microRNA、DN**段等多种物质，存在于血液、唾液、尿液、脑脊液和母乳等多种体液中。外泌体从发现至今已有30多年的历史，虽然较初被认为可能是细胞的“垃圾”，所以才被排出来，但是近年来研究表明外泌体具有功能活性并可进行细胞间信息传递。如今，研究已经发现外泌体在抗原提呈细胞中呈递抗原程中、一些病症细胞发生的发展、神经细胞信号转导过程中都发挥着重要作用。专利申请利用分离培养人尿液来源细胞并收集培养基来进行体外培养。外泌体的提取方法：超滤离心。成都外泌体提取试剂哪里买

外泌体的提取、分离方法：开发高效、快速、稳定，并且保持外泌体结构和生物功能完整性的方法，是目前外泌体应用于临床的基础和前提。从细胞上清和体液中提取分离外泌体的方法很多，但是外泌体的纯度和产量却和分离方法息息相关。通常分离步骤少、产率高，但是纯度会受到影响。鉴于每种分离方法都有其优缺点，实验可以根据样本来源、下游实验目的等，选择合适的外泌体分离方法。2015年，国际囊泡组织(InternationSocietyforExtracelluarVesicles,ISEV)指出，简单依靠一种分离方法得到的外泌体的纯度和产量都难满足实验的需求。因此，推荐联合使用各种方法，从而得到高纯度和高产量的外泌体。深圳外泌体提取试剂报价外泌体表面有其特异性标记物，用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合。

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA，Exosome可通过细胞膜受体直接受体细胞，也可运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至细胞器进入受体细胞，参与细胞间通讯。Exosome在免疫应答、炎症反应、血管生成、凋亡、凝血和废物处理等生理过程发挥关键作用，不同细胞来源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不尽相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病。miRNA是一类22nt左右大小的非编码分子，它可以通过外泌体从一个地方转运到另外一个地方行使基因沉默功能。通过检测外泌体中miRNA表达变化，可以发现外泌体中miRNA特异性功能。

外泌体的提取主要包括以下几种方式：一是超速离心法，这是目前外泌体提取较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心，这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期准备工作繁杂，耗时，量少。四是免疫磁珠法，这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单、不需要昂贵的仪器设备，但是非中性pH和非生理性盐浓度会影响外泌体生物活性，不便进行下一步的实验。五是PS亲和法，该方法将PS（磷脂酰丝氨酸）与磁珠结合，利用亲和原理捕获外泌体囊泡外的PS。该方法与免疫磁珠法相似，获得的外泌体形态完整，纯度较高。由于不使用变性剂，不影响外泌体的生物活性，外泌体可用于细胞共培养和体内注射。2016.9《ScientificReports》杂志发表了该方法较新数据，表明PS法可提取相当高纯度的外泌体。六是色谱法，这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。外泌体的提取方法：色谱法。

在无菌条件下提取人体体液，并用PBS缓冲液进行稀释，然后通过离心筛选初步去除体液中的细胞成分和细胞碎片，制成体液样本备用；体液样本纯化：通过过滤膜对上述体液样本进行过滤，进一步去除体液中的细胞残片及其他杂质，静置10～15分钟，留取沉淀物备用；外泌体提取：将上述沉淀物用PBS缓冲液进行悬浮，使外泌体悬浮于液体上层，然后用无菌针管吸取上层含有外泌体的液体，置于80℃储存备用。此提取方法条件复杂，成本高，专利申请利用静置不太可能把外泌体沉降下来；根据外泌体表面的特异生物化学特性通过提取试剂的特异配方把外泌体从水相中沉降下来。不同细胞分泌的外泌体具有不用的组成成分和功能，可作为疾病诊断的生物标志物。用于外泌体提取的体液收集注意事项：抽血时间。济南外泌体提取试剂服务电话

外泌体作为内源性的天然药物载体有着独特的优势，表面由脂质和蛋白质组成。成都外泌体提取试剂哪里买

外泌体的提取、分离方法：尺寸排阻色谱法和超滤法；尺寸排阻色谱法是利用分子筛理论，较初是根据蛋白质分子大小分离蛋白质的色谱技术。该方法的主要优点是不需要很大的离心力，从而保证了外泌体的完整性。Mol等[13]对比超高速离心和尺寸排阻色谱法得到的外泌体蛋白，结果显示，后者得到的外泌体的蛋白丰度高于前者。这些基于过滤或尺寸排阻色谱的新方法为外泌体大规模的生产和临床应用提供了可能。超滤也是根据外泌体的尺寸将其分离出来的一种方法，超滤一般被认为是外泌体分离过程中的一个准备过程，通过超滤除去大分子和小分子的蛋白质。不过连续的超滤可以分离出外泌体，和超高速离心相比，超滤不需要特殊的设备就可以较短时间内分离出外泌体。但是，超滤膜对外泌体的黏附作用会降低外泌体的产量，并且超滤过程中施加的外力可能会使外泌体变形或者破裂。成都外泌体提取试剂哪里买