芜湖正规鼠尾胶原哪家好

鼠尾胶原蛋白：胶原蛋白（Collagen）是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分，但在皮肤、肌腱、骨骼中分布较为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型，I型胶原蛋白（Collagen, Type I）结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体，在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构，被普遍用于多种细胞的培养基质，如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外，I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织形态的发生等方面也具有重要应用。胶原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根据Birkedal-Hansen方法，经过醋酸（HAc）抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得，可用于制备三维胶，模拟细胞真实的生长环境；也可以用于包被组织培养皿表面，提高细胞表面粘附性，比如培养角质形成细胞、肝细胞等原代细胞。将无菌5cm左右的纱布海绵贴在150mm培养皿的盖子上来制备氨蒸气室。芜湖正规鼠尾胶原哪家好

要准备的器具：组织剪2把，有齿镊1把，无齿镊1把，200 ml烧杯1个，培养皿1个，带盖广口瓶1个，离心管、小瓶数个，滴管若干。以上物品须经严格高压消毒灭菌。需配制的液体0.1％醋酸溶液。经44.48N10 min高压蒸汽灭菌(或是过滤除菌)后备用。此外还有用消毒双蒸水配制75％酒精溶液。取大鼠尾巴，洗净，置75%酒精浸泡消毒后，手持尾巴，用止血钳夹住尾巴较高，折断尾骨后拉出尾腱，将尾腱剪碎后置消毒的三角烧瓶中，称尾腱的重量，按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液，摇晃，使尾腱分散于醋酸溶液中，4℃放置48 小时，离心。吸取其上清，分装至小瓶，4℃保存。上述制备过程均在无菌条件下完成。上海鼠尾胶原厂家供应当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片，制备细胞爬片时，可在瓶底涂一层胶原。

鼠尾胶原包被培养板：胎干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,进而形成血管,因而成为血管组织工程理想的种子细胞来源之一。目的:探讨建立定向诱导人胚胎干细胞向血管内皮细胞分化的方法。方法:在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养人胚胎干细胞H1,将H1细胞团块转移到鼠尾胶原包被的培养板,贴壁24-48h后,培养基换为含不同辅助因子和内皮细胞生长添加剂的EGM-2内皮细胞培养基。结果与结论:①在EGM-2内皮细胞培养基诱导下,细胞逐步表达内皮细胞特异性标记基因VEGFR-2、PECAM1、vWF、CD34、VE-cadherin、GATA-2。②分化细胞表达内皮细胞特异性标记VE-cadherin、CD31。③分化细胞具有吞噬低密度脂蛋白功能。说明将人胚胎干细胞接种在鼠尾胶原包被培养板上,通过EGM-2内皮培养体系诱导,可直接分化为功能性血管内皮细胞。为研究胞外基质对诱导胚胎干细胞血管内皮细胞分化的作用以及相关信号分子机制打下了基础。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1M NaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1M NaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10× PBS）—V（1M NaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。制备鼠尾胶原：手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的，折断尾骨后拉出尾腱。

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用说明：含细胞的三维胶原的制备（以配制1毫升，1mg/ml三维胶为例）：准备好悬浮于培养液的细胞，并放置于冰浴中。将200ul鼠尾胶原蛋白I型 (5mg/ml)加到12ul 0.1mol/L NaOH中（如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入23ul 10×PBS或10×培养液，混匀(混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液，混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放置20分钟待胶凝固后，加入适当体积的细胞培养液，转移到培养箱中培养。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。4°C沉淀10小时，去除上清液，絮状溶液高速冷冻离心处理，收集沉淀。天津正规鼠尾胶原厂家直销

鼠尾胶原醋酸溶解：制备成浓度为0.1%的溶液。芜湖正规鼠尾胶原哪家好

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：胶原蛋白具有抗氧化作用，但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建，对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的：探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法：将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿（实验组）和普通培养皿（对照组）中，并且均用0，10，100μmol/L H2O2诱导。24 h后，以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态，应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率，TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态，流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率，黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力，硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平，Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。芜湖正规鼠尾胶原哪家好