无锡武汉RNA提取试剂

RNA提取浓度不高或质量不佳原因及解决办法：1、RNA降解：可能是提取样本本身降解，或者是在提取过程中导致的降级；应当尽可能使用新鲜样本进行RNA提取，采集的样本应当及时置于液氮或者-80℃冰箱冻存，并减少反复冻融。在RNA提取过程中应当使用RNase/DNasefree的吸头、离心管及其他材料，提取过程尽可能的快，提取后的RNA应置于冰盒上并及时放于-80冻存。如提取后的RNA需要进行凝胶电泳检测，则应提取好后立刻进行电泳，电泳缓冲液应更换新配制的。2、盐及有机溶剂残留：提取试剂中含有酚及胍盐，洗涤液中含有乙醇，在提取过程中裂解液吸弃不彻底，洗液没有充分晾干导致的，残留的盐及有机溶剂对后续的逆转录和PCR均存在不同程度的压制作用，因此在提取过程中应充分去除组织裂解液，洗涤时应充分，使管壁四周均能被洗涤到，另外管子空离和吹风是必须的步骤，会进一步降低有机物残留。买点无酶的吸头、离心管，找一个普通的试验台，穿好实验服戴好手套，保护好自己就好。无锡武汉RNA提取试剂

提取RNA的详细步骤：首先，将研钵晾干够，倒入1/3体积的液氮，加入0.2g均质的植物材料，充分研磨后转入一个含有300微升GMT的1.5ml的离心管中，摇匀。然后，加入30微升2mol/lNaAc进行摇匀，加入300微升酸酚摇匀，加入100微升的氯仿摇匀。然后，在四摄氏度12000r/min下离心二十分钟，吸取上清液的3/4，加入等体积的异丙醇，于冰上放置十五分钟。然后，在四摄氏度12000r/min下离心十分钟，将沉淀悬浮于含100微升的4mol/lLiCl小试管中，于-20摄氏度下放置过夜。然后，在4摄氏度13000r/min下离心10-15min，将沉淀溶于0.4mlDEPC处理水中，加入1/2体积氯仿和1/2体积酸酚，摇匀，进行抽提，在4摄氏度13000r/min下离心五分钟。将上清液中加入等体积的氯仿摇匀，进行抽提，在四摄氏度13000r/min下离心五分钟，上清液中加入1/10体积3mol/lNaAc和两倍体积的午睡乙醇与-20摄氏度放置一小时。厦门正规RNA提取试剂厂家现货RNA提取试剂注意事项：如皮肤接触TRIReagent，请立即用大量去垢剂和水冲洗。

常用总RNA提取试剂：异硫氰酸胍法和Trizol法是动物组织及动物细胞总RNA提取较常用的方法，异硫氰酸胍法操作简单快捷，适用于样本足够大的常规动物组织；Trizol法裂解能力较强，尤其适合小样本及特别难提取的组织，如兔子皮肤，动物结缔组织等总RNA的提取；另外Trizol作为一种通用型的裂解试剂，还可以用于植物组织、细菌、菌类等组织的提取。对于含多糖多酚的植物组织如油茶、茶叶、油菜等还可以使用CTAB法进行总RNA的提取。提取RNA时我们经常遇到的问题是：(1)RNA产量较低；(2)RNA有严重的盐类污染；(3)RNA有严重的有机溶剂污染；(4)样品降解等问题。

RNA提取醇沉淀不是越多就越好。有些实验方案会推荐，在异丙醇沉淀后，用乙醇沉淀两次。实际上，任何提取实验，都会在纯度和得率这一对矛盾中取舍。醇沉淀会将脂溶性杂质去掉，但部分非脂溶性的杂质依然会连同RNA一起被沉淀下来。因此，多整几次，并不会让RNA的纯度翻倍，反而还会有降低得率的风险。一般情况下，异丙醇和乙醇各沉淀一次即可。但是，倘若预计RNA浓度很低，那就只能放弃纯度，在低温沉淀数小时，以换来较高的得率。围绕DEPC的玄学。许多实验方案会推荐使用0.1%DEPC处理RNA相关用水，以灭活RNase。这一点是要肯定的。不过，在使用DEPC的过程中，又充斥着一些玄学。高压灭菌后的DEPC水，会有一股“香甜”的味道。许多人会以为那是残留的DEPC而不敢用。实际上，这只是DEPC分解成CO2和乙醇后，产生的一些挥发性酯类副产物。在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。

昆虫RNA柱式提取试剂盒使用方法：将50～300mg昆虫组织放入10～15mL塑料离心管中，加入1mL溶液A，然后用匀浆器匀浆5～20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮砚磨法破碎昆虫组织，砚磨完后加入1mL溶液A。注意：溶解溶液A沉淀。溶液A在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。将匀浆物或砚磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备氯仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。室温12000rmp离心3～5分钟，两相间将有约5-10毫米厚的细胞破碎物。将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。较好留下100μL上清液不取。加入等体积的溶液C，充分颠倒混匀。血浆/血清RNA提取试剂盒：高效去除植物组织中的色素、酚类等杂质，提取RNA的纯度高，产量大。郑州RNA提取试剂平均价格

血浆/血清中miRNA提取试剂盒：是专门针对血清、血浆样本中miRNA提取而开发的。无锡武汉RNA提取试剂

新型土壤总RNA快速提取试剂盒：独特裂解剂/裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶，然后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于玻璃奶，然后将粗纯化的玻璃奶转移到离心柱，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,漂洗液将腐植酸、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的洗脱缓冲液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。兼容性强，适用于各种不同的土壤、粪便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9以上，可直接用于PCR，Northern-blot和各种酶切反应。无锡武汉RNA提取试剂