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外泌体（exosome）是所有细胞释放出的细菌大小的颗粒。它们天然地存在于血液中。根据来自美国德州大学MD安德森一些疾病中心的一项新的研究，对外泌体进行基因操纵可能提供一种新的胰腺病治病方法。论文通信作者为德州大学MD安德森一些疾病中心一些疾病生物学系研究员RaghuKalluri博士。在这项新的研究中，经过基因修饰的外泌体（被称作iExosome）能够运送特异性地靶向KRAS突变基因的小RNA分子，从而导致胰腺病模式小鼠病情缓解，增加它们的总存活率。这些研究人员采用了一种被称作RNA干扰（RNAi）的靶向方法：利用这些天然的纳米颗粒（即外泌体）运送小干扰RNA（siRNA）或短发夹RNA（shRNA）分子来靶向胰腺病细胞中的KRAS突变基因，从而影响多种胰腺病模型的一些病症负荷和存活。他们证实外泌体能够作为一种高效的RNAi载体发挥作用，这是因为这些纳米大小的囊泡（即外泌体）轻松地在体内迁移和进入靶细胞（包括病细胞）中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。无锡外泌体提取试剂厂家推荐

外泌体相关miRNA与肺病的诊断：进一步研究发现，另外6种外泌体（miR-151a-5p、-30a-3p、-200b-5p、-629、-100、-154-3p）可用于肺病的诊断，其AUC为0.76。这些miRNAs具有NSCLC早期诊断的高度敏感性，有望成为NSCLC早期诊断筛查的生物标志物。在临床应用方面，目前ExosomeDiagnostics公司研发的基于血浆外泌体的ALK试剂盒已于2016年初被美国FDA批准用于临床。这是世界上个以血液样本分析外泌体RNA的临床液体活检。这项方法可以准确、实时地检测NSCLC患者的EML4-ALK突变，通过比较NSCLC患者组织ALK水平和相应的血浆样本发现该项检测可以达到88%的诊断灵敏度和100%的诊断特异性。而此前，对于EML4-ALK的检测是基于组织活检的FISH或IHC，而且，FISH缺乏灵敏性，误诊率也较高。徐州外泌体提取试剂生产厂家通过超速离心(120000g/分钟)20小时以上才能获得足够的外泌体量。

外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。聚乙二醇（PEG）可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀，早先应用于从血清等样本中收集细菌，现在也被用来沉淀外泌体，其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。利用PEG沉淀外泌体存在不少问题：比如纯度和回收率低，杂蛋白较多（假阳性），颗粒大小不均一，产生难以去除的聚合物，机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等，因此发表文章时易受质疑。

研究中研究人员发现，胃病细胞周围富含TAM。TAM以M2极化表型为特征，并促进胃病细胞在体外和体内的迁移。此外，研究人员发现M2衍生的外泌体决定了TAMs介导的迁移活动。通过使用质谱方法，研究人员确定载脂蛋白E（ApoE）是M2巨噬细胞衍生的外泌体中高度特异性和有效的蛋白质。ApoE是一种M2特异性且高度丰富的来源于M2外泌体的蛋白质，是决定胃病细胞迁移潜力的主要驱动因素。然而，来自ApoE-/-的小鼠M2巨噬细胞的外泌体在体外和体内对胃病细胞的迁移没有显着影响。在机制上，M2巨噬细胞衍生的外泌体介导ApoE启动的PI3K-Akt信号通路，并在TAM和受体胃病细胞之间进行细胞间转移，促进细胞骨架的迁移。总的来说，该研究发现外泌体介导的功能性ApoE蛋白从TAM转移到一些病症细胞，促进了胃病细胞的迁移。是一种用于一些病症诊断和预后监测的非常理想的新型生物标记物一些疾病的早期诊断。

外泌体的提取主要包括以下几种方式。一是超速离心法，这是目前外泌体提取较常用的方法。此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡不是外泌体。二是过滤离心，这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。三是密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期准备工作繁杂，耗时，量少。、外泌体的分离纯化一直是科研工作者关注的问题，获得高纯度的外泌体对后续的研究至关重要。武汉外泌体提取试剂价格

超离法是较常用的外泌体纯化手段，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。无锡外泌体提取试剂厂家推荐

外泌体相关技术在过去几年一直在快速发展，预计市场将大幅增长，因为它们可被应用到液体活检、精细医学和再生医学领域。特别是，一些疾病衍生的外泌体通过调节血管生成、转移和免疫来影响细胞的侵袭性，使其成为用于一些疾病检测、诊断和治病选择的极其有用的生物标志物来源。在风险投资方面，有很多市场活动。2016年1月，ExosomeDiagnostics公司在B轮融资中获得6000万美元资金，并于2017年7月获得3000万美元的C轮融资。同样，CodiakBiosciences公司于2016年由MDAnderson一些疾病中心与两家风险投资公司共同成立，以8000多万美元的A和B轮融资成立该公司。2017年11月29日，CodiakBioSciences公司又增加了7650万美元的C轮融资。在整个A、B和C轮融资中，CodiakBioSciences公司募集了惊人的1.685亿美元。无锡外泌体提取试剂厂家推荐

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