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糖类染色实验——糖原染色：高碘酸氧化液：高碘酸 0.5 g，蒸馏水 100 ml。此液溶解后放入冰箱中待用。Schiff 染色液：碱性复红 1 g，1mol/L 盐酸 20 ml，焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）2 g，双重蒸馏水 200 ml。先将 200 ml 双重蒸馏水煮沸，稍有火焰，加入 1 g 碱性复红，再煮沸 1 min，冷却至 50℃ 加入 20 ml1mol/L 盐酸，待 35℃ 时加入 2 g 焦亚硫酸钠。室温中 2 h 之后见稍带红色，5 h 之后变为无色液体。棕色瓶内装好，放入冰箱中保存待用。1. 石蜡组织切片，常规脱蜡至水。2. 蒸馏水洗 2 次。3. 高碘酸氧化液处理 10～20 min。4. 充分蒸馏水洗。5. Shciff 液染色，染色 10～20 min（如果室温在 15℃ 以下时，可在湿盒内加入温水而加快反应）。6. 流水冲洗 3 min（对于着色较深的切片可适当缩短时间）。7. 用 Mayer 明矾-苏木**染细胞核 3～5 min。8. 0.5％ 盐酸乙醇液分化 30s，自来水浸洗 2 min。取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。江苏提供糖原染色试剂盒厂家现货

糖原pas染色液配制及使用方法：1、常规固定，常采用 10%的福尔马林，常规脱水包埋。 2、石蜡切片脱蜡入蒸馏水；冰冻切片直接入蒸馏水。 3、自来水冲洗 2～3min，再用蒸馏水浸洗 2 次。 4、入过碘酸溶液，室温放置，一般不宜超过 10min。 5、自来水冲洗 1 次，再用蒸馏水浸洗 2 次。 6、入 Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染。 7、自来水冲洗 10min。 8、入苏木素染色液，染细胞核。 9、酸性乙醇分化液分化。 _x000c_10、自来水冲洗 10～15min，更换蒸馏水清洗，使其返蓝。 11、逐级常规乙醇脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。江西品牌糖原染色试剂盒推荐厂家冷冻切片染色效果不佳,成熟时间2个月,染色时间一般15-20分钟。

染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病 该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。

糖原染色正常值:正常情况下，红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等，幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞，巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，腺细胞呈阳性反应。将动物杀死后迅速取出所需要的组织。

糖类染色：糖类从组织化学技术角度来分，可分为多糖、中性粘液物质、酸性粘液物质、粘蛋白及粘脂质。多糖主要指糖原，它是一种胶样液态存在于肝细胞、骨骼肌、心肌等处。因糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变，故糖原的染色在临床病理诊断上具有重要意义。（1）肝及心肌糖原沉着症的诊断：糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。（2）糖尿病性肾小球硬化症或血管病的诊断。（3）高雪氏病与尼曼——匹克氏病的鉴别：前者为阳性、后者为阴性，做此染色较易鉴别。（4）骨内骨外尤文氏肉瘤的诊断：此瘤 80%细胞内有较多糖原，糖原染色为阳性，所以糖原染色为阳性（大多数细胞）可以协助诊断。（5）腺泡状软组织肉瘤与化感瘤：前者棒状小体糖原染色为阳性。拥有千锤百炼的专业人才队伍，保证实验快速、有效的完成。福建品质好的糖原染色试剂盒厂家批发价

切出的石蜡切片要好，不能有皱褶或者刀痕，切片不能太厚。江苏提供糖原染色试剂盒厂家现货

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂 配制：（1）0. 5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入 蒸馏 水成1000ml） 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。江苏提供糖原染色试剂盒厂家现货

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