湖南如何使用糖原染色试剂盒

粘液染色法：粘液一般有以下几点特性：（1） 对盐基性染料有亲合力，因此在HE染色中、切片上的粘液呈污秽蓝色。（2） 对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。（3） 遇醋酸发生沉淀，胃粘蛋白则除外。（4） 溶于弱碱溶液。常用的粘液染色有以下几种：1、P．A．S染色法：操作方法同前，结果；中性粘液性物质，某些酸性粘液物质呈红色，核呈蓝色。2、AB/P.A.S染色法：该种方法的特点是能同时显示出酸性和中性粘液物质。操作方法：（1）切片常规脱蜡入水。（2）3%醋酸液洗2分钟，入1%阿利新兰醋酸液（PH2.5）10-20分钟。（3）蒸馏水洗。（4）按P.A.S染色程序。（5）苏木素淡染2-3分钟，水洗。（6）常规脱水、封片。亚硫酸钠须有浓厚气味，器皿必须洁净而干燥。湖南如何使用糖原染色试剂盒

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂 配制：（1）0. 5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入 蒸馏 水成1000ml） 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。江西品质好的糖原染色试剂盒推荐厂家动物材料取用时需对动物施以麻醉，常用的麻醉剂有氯仿和。

糖原D-PAS染色液注意事项：1、切片脱蜡应尽量干冷，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前较好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。

糖原染色：细胞内含1，2-乙二醇基的多糖类经过碘酸氧化后产生醛基，与特殊染液作用，使无色品红变成红色化合物，沉淀于胞质之中。红色的深浅与细胞中起反应的1，2-乙二醇基的量呈正比。用于不典型巨核细胞与李—斯细胞的鉴别，前者PAS反应为强阳性，后者为阴性或弱阳性；用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别，前者PAS反应为强阳性，而后者反应为阴性或弱性。正常值正常情况下，红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞；粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。本试剂盒适用于骨髓细胞涂片，血液细胞涂片。

PAS染色的临床意义：1.红细胞系统：①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比增高，阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血）以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时，幼红细胞为阴性反应，有时*个别幼红细胞呈阳性反应。取材必须新鲜，这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要。江苏口碑好的糖原染色试剂盒厂家直销

冷冻切片染色时间尽量要短。湖南如何使用糖原染色试剂盒

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。湖南如何使用糖原染色试剂盒

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