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转染的注意事项：培养基中的物品物品，比如青霉素和链霉素，是影响转染的培养基添加物。这些物品一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使物品可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率低。所以，在转染培养基中不能使用物品，甚至在准备转染前进行细胞铺板时也要避免使用物品。这样，在转染前也不必润洗细胞。对于稳定转染，不要在选择性培养基中使用青霉素和链霉素，因为这些物品是GENETICIN选择性物品的竞争性克制剂。转染试剂与细胞不匹配细胞转染较适合的不是原代细胞。金华正规细胞高效转染试剂直销价

细胞转染实验注意事项：1.培养基中的物品物品是影响转染的培养基添加物。这些物品一般对于真核细胞无毒，但阳离子脂质体试剂增加了细胞的通透性，使物品可以进入细胞。这降低了细胞的活性，导致转染效率降低。这时候可以选择Entranster转染试剂，非脂质体试剂，培养基可加物品，避免了细胞染菌。2.设置阳性对照和阴性对照。3.一般在转染24-48h，靶基因即在细胞内表达。根据不同的实验目的，24-48h后即可进行靶基因表达的检测实验。4.如若建立稳定的细胞系，则可对靶细胞进行筛选，根据不同基因载体中所含有的抗性标志选用相应的药物，常用的真核表达基因载体的标志物有潮霉素和新霉素等。杭州正规细胞高效转染试剂哪家便宜一般的瞬时转染 方法多采用脂质体法。

影响转染试验的因素：1.转染试剂跟细胞系不匹配转染试剂跟细胞系也是讲究配合默契的，使用同一种试剂，不同细胞系转染效率通常不同。但细胞系的选择通常是根据实验的需要，因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献，通过这些资料可选择较适合实验设计的转染试剂。当然，较适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。因为有些细胞系是不稳定的，可能随着培养时间的改变，培养条件的不同，不同的选择压力，可能引起不同的克隆选择。因此就算是同一个细胞系，在不同条件下转染能力的差异可能会很大。

转染的注意事项：用于蛋白生产的细胞的转染可以在添加有血清或无血清培养基中进行。但更倾向于使用无血清培养基表达蛋白，因为血清蛋白会干扰下游表达蛋白的纯化。无血清培养基一般针对某一特定细胞类型优化并有几类无血清培养基不需要添加血清，一般含有不均一的或大量的蛋白（但比添加血清的培养基低得多）。无蛋白培养基不含蛋白但可能含有不明成分的抽提物，限定化学成分的培养基不含有蛋白或未知组成的成分。多种多样的配方使您可以选择较适合您应用的一种。在含血清时转染的细胞可以适应无血清培养基，无蛋白培养基或限定化学成分的培养基。在部分情况下（如293-F，293-H，COS-7和CHO-S），对于已适应无血清或无蛋白培养基的细胞，可以使用其培养基进行转染。其他一些无血清培养基包含克制阴离子脂质体介导转染的成分，在这些情况下，有必要在诸如D-MEM或OPTI-MEMⅠ等培养基中进行培养和转染。细胞易于生长到高密度并合成更多蛋白。

如何提高细胞转染效率：1.组织培养试剂优化细胞生长条件。只使用新鲜配制的培养基和添加剂，并经可能减少所用试剂的变更。基础培养基—目前所使用的各种市售培养基(如，RPMI1640和DMEM)。培养基的成分包括营养物质(氨基酸，葡萄糖)，维生素，无机盐，和缓冲物质。有些成分非常不稳定，因此如果不在使用时新鲜加入就可能会产生问题。务必要使培养基避光保存。因为已知有一些组分和缓冲物质，如HEPES，当暴露于光照下就会分解产生细胞毒性物质。另外，血清，添加剂，来自于培养箱内的污染物、化学物质，或/细胞的污染也都可能影响到细胞生理。2.细胞生长状态密切观察您的细胞;确保它们状态良好。在开始转染细胞之前，先制定一个适当的种板方案，使细胞密度从转染开始到结束都保持较佳状态。增加成功几率—细胞是转染过程中的一个关键元素，它可以是影响结果的一致性和质量的较重要的变量。细胞密度以及转染的时间长短和培养基中血清的含量都是影响转染效率的重要因素。合肥深圳细胞高效转染试剂

在转染过程中是可以使用血清的。金华正规细胞高效转染试剂直销价

细胞转染效率低下的几个大坑：1.不注意细节在转染之前更换一次37℃预温的培养基，可提高转染效率。脂质体和DNA/RNA混合物应当一滴一滴地滴下来，从培养皿一边滴到另一边，边滴边轻摇培养皿，以确保均匀分布和避免局部高浓度。这些都是一些细枝末节，但是，如果不注意的话，也会造成转染效率低下。2.细胞状态不好细胞状态不好，会导致转染效率低下。一般进行转染的细胞应该处于对数生长期。如果是贴壁细胞的话，贴壁率应该在70-80%；如果是悬浮细胞的话，应该是6X105个/孔（24孔板），一般是转染前现在换液，转染前用无血清培养基或PBS洗细胞一次。转染的整个过程都不应该有物品。金华正规细胞高效转染试剂直销价