鼠尾Ⅰ型胶原:材料与方法:1. 主要材料、试剂和仪器鼠尾、盐酸、等渗氯化钠溶液、钙液、磷液均购自上海晶纯生化科技股份有限公司。日立高新TEM HT770(日本日立公司);多功能粉末X射线衍射仪。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白取大鼠尾巴洗净,用75%的乙醇浸泡5 min。将尾巴剪开,去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的肌腱。将肌键剪断置于平皿中,用无菌等渗氯化钠溶液浸泡。吸去等渗氯化钠溶液,将肌键置于平皿中剪碎,按每克肌键50 mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。摇晃,将肌键分散于醋酸溶液中,4 ℃放置一周,然后以2186×g离心20 min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成胶冻状凝胶,置于冰箱4 ℃保存。从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。郑州鼠尾胶原服务电话

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:胶原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT 比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL 法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot 检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。无锡正规鼠尾胶原产品介绍鼠尾型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。

胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解, 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃, 5000g 的离心力下离心 20min, 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。
鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:三维胶原的制备 鼠尾胶原蛋白 型在浓度1mg/ml 以上, pH 左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度 1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中,在成胶过程中需要加入 0.06体积的 0.1mol/L NaOH 来中和。 需要的溶液 (均需要无菌、 预冷) 10mg/L 酚红用于pH 指示) 0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一 般不用),双蒸水 200ul鼠尾胶原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到胶原溶液中, 会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的 胶原凝结) 立即混匀。再加入 100ul 10PBS 10培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后 pH 左右,如果PBS 或培养液中没有加 酚红,初次使用时需要用 pH 试纸测试)。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性。

鼠尾胶原备用胶凝程序:1)在冰上放置以下物品:胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1M NaOH。2)确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3)在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4)在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS(终体积/10)mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积(不要添加到管中直到步骤4.6为止)终体积x终胶原蛋白I浓度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的胶原体积×0.023)mL的无菌冰冷1M NaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水:添加蒸馏水体积=V(终)—V(胶原蛋白)—V(10× PBS)—V(1M NaOH)4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积,混匀,冰上备用。5)胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6)使用时,无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性。石家庄鼠尾胶原直销厂家
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。郑州鼠尾胶原服务电话
鼠尾胶原蛋白的用途是什么:将尾巴从动物身体切除后,会冷冻起来,并提取尾巴里的筋腱。然后,将筋腱切成小块,并在离心处理之前添加到由醋酸和水勾兑而成的混合物中。用这种方法,能将胶原蛋白从动物材料中分离出来。在食品加工领域,鼠尾胶原蛋白用于生产明胶并添加到布丁和棉花糖中。它还可以当作酸奶,冰淇淋,果酱和奶油芝士等食品的增稠剂使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感觉和质地。它还用于生产膳食保健品,据说能让手指甲和皮肤看起来更好。此外,还有基于胶原蛋白的保健品,可用于促进关节健康。郑州鼠尾胶原服务电话
利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。方法通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白,并重构成胶原纤维。然后,将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2~6d,通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。结果酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维,并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示:矿化2d后,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维,胶原纤维部分矿化;矿化6d后,胶原纤维内部完全矿化,形成Ⅰ型胶原蛋白/羟基磷灰石钙的仿生骨材料。结论利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维,经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨...