要准备的器具:组织剪2把,有齿镊1把,无齿镊1把,200 ml烧杯1个,培养皿1个,带盖广口瓶1个,离心管、小瓶数个,滴管若干。以上物品须经严格高压消毒灭菌。需配制的液体0.1%醋酸溶液。经44.48N10 min高压蒸汽灭菌(或是过滤除菌)后备用。此外还有用消毒双蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗净,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血钳夹住尾巴较高,折断尾骨后拉出尾腱,将尾腱剪碎后置消毒的三角烧瓶中,称尾腱的重量,按每克尾腱50ml 的比例加入0.1%醋酸溶液,摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48 小时,离心。吸取其上清,分装至小瓶,4℃保存。上述制备过程均在无菌条件下完成。鼠尾胶原,是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。北京正规鼠尾胶原哪家便宜

鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。太原正规鼠尾胶原直销厂家胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网,它会牢牢地留住就要流失的钙质。

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25 度左右)下 放置 20 分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是 10PBS, 使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。 B.含细胞的三维胶原的制备(以配制 200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul 0.1mol/L NaOH 加到胶原溶液中,会由于 NaOH 不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即 混匀。再加入 23ul 10PBS 10培养液,混匀(混匀后pH 左右,如果 PBS 或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用 pH 试纸测试)。加入 760ul 的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放 20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。 注意事项 型在室温下pH 中性时可迅速成胶,在操作过程中要 尽量保持低温。鼠尾肌腱胶原蛋白I(rat tail tendon collagen type I)根据Birkedal-Hansen方法,经过醋酸(HAc)抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得。
鼠尾胶原蛋白的提取方法,采用酸法与酶法相结合的工艺,保持恒低温无菌的环境,利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心,简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液,并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中,进行多次真空冷冻干燥,并经进一步处理获得含水率在3%以下的胶原蛋白微粉;较后由灭菌、无菌包装,成品胶原蛋白粉末的纯度在98%以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了产率和生物相容性,降低了成本,适用于生物医用材料,所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。

鼠尾胶原蛋白的获取也相当“讲究”,首先要以无毒方法捕到家鼠。取尾长20cm以上者,齐尾根部切下尾巴,洗净后浸于75%酒精中。在无菌操作下剥去鼠尾皮肤,即可见附于鼠尾骨上的4束韧带。每束韧带中,位于外面及近骨一面的为白色纤维,较光洁,微发亮。纤维之间为易碎裂的间质。而剥去下来的“纤维”,就放置在嘉兴眼库中,以供需要时及时提取。让小小的老鼠尾巴发挥其神奇的作用,以医学人严谨、踏实、不断进取的医学态度,让鼠尾胶原蛋白帮助更多的人,恢复角膜的光明,重现光明的世界。4°C沉淀10小时,去除上清液,絮状溶液高速冷冻离心处理,收集沉淀。厦门鼠尾胶原供应商
它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。北京正规鼠尾胶原哪家便宜
鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响:目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原多聚赖氨酸明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。北京正规鼠尾胶原哪家便宜
鼠尾胶原蛋白耗子尾汁还能变得更加,一种被称作鼠尾胶原蛋白的“珍贵”液体就来自大鼠的尾巴,制作过程需要经历醋酸抽提、氯化钠沉淀和磷酸氢二钠沉淀等步骤,才能从鼠尾中获得珍贵的胶原蛋白。这种胶原蛋白在37℃的条件下会形成3股螺旋结构,可以用来当作细胞培养的基质。细胞培养过程中,细胞需要贴附在培养皿表面(悬浮培养细胞除外)才能完成生长过程,而有一些细胞却总是不太给力,自己完成不了贴壁过程或者贴壁困难,这个时候鼠尾胶原蛋白就能承担起让细胞更容易贴壁的作用。这一步也被称作涂层(coating),给培养皿涂上了一层胶原蛋白后,细胞就能更好地贴附上去,除了培养皿,一些需要使用海藻碳酸钙微球培养得细胞,同样也可...