制备液相色谱柱正确使用方法（附万立演示视频）“色谱柱”各位实验员们应该经常和它打交道吧，作为制备液相色谱实验的“心脏”，其初始状态直接决定分离精度与使用寿命，本期，我们就带大家拆解新柱试用的全流程，文中附上万立仪器实操演示，新手也能一次搞定！一、色谱柱试用前，请务必做好以下准备：1、检查色谱柱外观：观察柱体是否有磕碰变形，两端接口螺纹是否完好，若有包装破损，立即联系厂商更换。2、查看标签：重点记录3个关键参数——耐受压力、pH耐受范围、尺寸。3、冲洗仪器：在安装之前，先冲洗仪器管路，要保证系统管路中是没有杂质的状态，无缓冲盐等，防止污染新的色谱柱。4、检查系统连接：确保所有管路接头紧密，无泄漏。5、流动相与样品准备：①尽量使用流动相溶解样品。②使用色谱纯试剂和超纯水，并经过µm或更小孔径滤膜过滤和脱气。二、主要步骤：冲洗和平衡（含视频演示）新柱出厂时残留的生产溶剂等杂质，可能会导致基线噪声和鬼峰。必须通过冲洗去除杂质，再用流动相平衡固定相，这步是试用成功的关键。1、活化与平衡①可以先用100%的甲醇或者乙腈冲洗，选择小流速（20ml/min)，冲洗10-20倍柱体积；②再用甲醇：水或者乙腈：水（1：1）。 万立仪器液相色谱，多领域适配科研生产全场景。国产液相色谱仪品牌
在制备液相色谱实验中，哪怕一个微小的操作失误都可能导致实验功亏一篑。以下是两种最常见的“搞砸”情况，附具体原因分析与解决方案：一、柱子堵了：实验中断的“致命操作”错误表现：压力异常飙升（远超正常范围），流速骤降甚至断流，色谱峰形畸变（如拖尾、分叉），严重时仪器自动停机报错。常见原因：1、样品前处理不足：样品中含大量颗粒物、悬浮杂质，或未溶解的结晶物质，随流动相进入色谱柱，堵塞柱头筛板或孔隙。2、流动相污染：未过滤的流动相含微小颗粒，或有机相、水相混合后产生析出物（如缓冲盐浓度过高遇有机溶剂结晶）。3、操作不当：换柱时未冲洗接头，残留污染物进入新柱；或长期使用后未及时冲洗，柱头积累大量强保留杂质。解决方案：l紧急处理：立即降低流速至，用纯甲醇或水（根据柱子类型选择）低流速反向冲洗30分钟，尝试冲开堵塞物；若无效，需拆开柱头筛板，用超声清洗（可拆柱），或更换筛板。l预防措施：1、样品必须经μm滤膜过滤，超声脱气后再进样；2、流动相需经抽滤（有机相用尼龙膜，水相用混合纤维膜），缓冲盐溶液现配现用，避免长期存放析出；3、实验结束后，用10%甲醇水冲洗30分钟，再用纯甲醇封存，避免杂质残留。南通智能液相色谱仪系统小试量产无缝切换，万立液相色谱仪打通研发生产链路。
快速制备液相系统还具备操作简便、维护方便等优点，降低了科研人员的使用门槛，使得更多人能够轻松上手。三、全流程解决方案：贴心服务，全程陪伴除了提供专业的制备液相色谱仪产品外，万立仪器还致力于为客户提供全流程解决方案。从仪器的选型、安装、调试到后期的维护保养，万立仪器都有专业的团队为客户提供一对一的服务。这种贴心的服务模式不仅确保了仪器的正常运行，还为客户节省了大量的时间和精力。此外，万立仪器还定期举办技术交流会和培训活动。邀请行业内的学者和工程师为客户分享新的科研成果和技术动态。这些活动不仅拓宽了客户的视野，还促进了客户之间的交流与合作，为科研创新提供了更多的可能性。四、展望未来：持续创新，不断发展展望未来，万立仪器将继续秉承“提高科研效率”的理念，不断加大研发投入，推动技术创新和产品升级。公司将继续深耕于生命科学行业，为科研工作者提供更多专业、高效的分析仪器和系统。同时，万立仪器还将积极拓展国际市场，与全球科研机构和企业建立合作关系，共同推动生命科学研究的进步与发展。总之，万立（南通）仪器科技有限公司作为专业的制备液相色谱仪厂家。
需采用差异化的梯度优化思路，避免“一刀切”：1.杂质检测场景：优先保证“目标物与杂质分离”杂质检测（如药物有关物质、食品添加剂杂质）的主要是“目标物与相邻杂质峰分离度≥”，优化策略如下：步骤1：用“宽范围线性梯度”（如5%-95%乙腈，40分钟）初筛，确定目标物与杂质的保留时间区间；步骤2：在目标物与杂质出峰区间，设置“缓斜率分段梯度”（如），同时微调初始有机相比例（±2%），观察分离度变化；步骤3：若杂质峰形拖尾（如碱性杂质），可在水相中加入三乙胺（调节pH），同时保持梯度斜率平缓，避免拖尾加剧。2.复杂样品（多组分）场景：“分段梯度+梯度延迟”结合对于含10种以上组分的样品（如中药提取物、环境污染物），易出现“早出峰重叠、晚出峰展宽”，优化策略：采用“三段式梯度”：前段（强极性组分）：低初始有机相比例（如2%-5%）+缓斜率（1%），避免早出峰重叠；中段（中等极性组分）：中等斜率（），平衡分离与效率；后段（弱极性组分）：陡斜率（3%-5%/min）+终梯度维持（5分钟），缩短晚出峰时间，避免展宽。若出现“梯度鬼峰”（如梯度变化时出现杂峰）：可加入“梯度延迟时间”（即进样后先等度洗脱5-10分钟，再开始梯度）。万立仪器维护成本低，备件供应迅速，使用更省钱省心。
将单向阀取下依次放入水、异丙醇、甲醇中超声波清洗15-20分钟。溶剂泵维护①实验结束后，用纯水或甲醇冲洗泵头及管路，防止残留物沉积。②避免干转，泵运行时确保溶剂充足（确保管路浸满流动相液体）③柱塞杆密封圈需定期检查，若出现漏液或压力波动，应及时更换。色谱柱保养①定期清洗色谱柱，如果使用了含盐的流动相，先用甲醇：水1:9清洗，再置换成有机溶剂。②长期不用时，应将色谱柱冲洗干净并存放在适当溶剂中（如甲醇或乙腈）。③柱压异常升高，可能是柱头堵塞，需反向冲洗或更换。④柱载样量需控制在万立仪器推荐范围内，以免影响柱效。二、万立仪器特色维护要点1、流通池堵塞时压力会提高，请确保设定流速下压力不超过流通池耐压上限2mpa,否则会造成流通池泄露。2、用水、异丙醇、甲醇冲洗单向阀后，原样装回（可根据单向阀上的箭头确定方向，不要装反），在冲洗与泄压中，充满液体排完空气后可正常使用。3、若使用盐溶液后，需用去离子水冲洗，再置换有机溶剂。4、确保使用无颗粒溶剂，不建议循环使用，分析纯及以下建议μm膜过滤。三、设备易损件建议维护周期附上设备易损件建议维护周期，供参考，实际保养维护周期需根据使用频率/出现的问题来调整！制备液相色谱仪专为高效分离纯化设计，可在克级规模获得高纯度化合物。南通中压液相色谱仪厂家电话
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2.梯度斜率（变化速率）：控制“峰间距”的重心梯度斜率是指单位时间内有机相比例的变化量（如“2%乙腈/分钟”），是调节组分分离度与峰形的关键参数——斜率越缓，组分保留时间差异越大，分离度越高，但分析时间越长；斜率越陡，组分洗脱越快，峰形越尖锐，但易导致相邻峰重叠。优化技巧：分段梯度：“针对性调节关键区间”复杂样品常出现“某一段区间峰密集，其他区间峰稀疏”的情况，此时需放弃“线性梯度”，采用分段梯度：对峰密集区间用“缓斜率”（如1%/min），峰稀疏区间用“陡斜率”（如3%-5%/min），实现“重点区间精细分离，非重点区间快速洗脱”。▶示例：分析含5个组分的样品，若组分3与4在15-20分钟内重叠，其他组分分离良好，可设置梯度为：0-15分钟：5%→30%乙腈（斜率）；15-25分钟：30%→35%乙腈（斜率，缓梯度分离重叠峰）；25-30分钟：35%→95%乙腈（斜率12%/min，快速洗脱剩余组分）。斜率微调原则：“小步试错，看峰形定方向”若相邻峰分离度不足（R<）：将该区间的梯度斜率降低20%-50%（如从2%/min降至1%/min），观察分离度是否提升；若峰形宽矮（拖尾因子T>）：适当提高斜率（如从1%/min升至），增强洗脱强度，压缩峰宽。国产液相色谱仪品牌
