研究蛋白-蛋白相互作用(PPI)对于理解细胞信号网络至关重要。传统的酵母双杂交、免疫共沉淀等方法操作复杂、通量低。以Alpha技术为表示的均相发光方法彻底改变了这一局面。将靶蛋白A与供体珠偶联,互作蛋白B与受体珠偶联。当A和B在溶液中相互作用时,拉近两珠产生信号。该方法可在纯化蛋白、细胞裂解液甚至活细胞培养基中进行,不只能验证已知互作,更能用于高通量筛选破坏或促进特定PPI的小分子化合物。其均相特性使得可以实时监测互作动力学,研究互作强度,为药物发现和基础生物学提供了强大工具。均相化学发光与荧光免疫技术相比,优势在哪?辽宁技术升级均相发光优点

传统的化学发光免疫分析(CLIA)多为异相,需要固相包被和洗涤。均相化学发光免疫分析则通过精巧设计免除了这些步骤。一种常见策略是使用空间位阻或能量转移淬灭。例如,将化学发光标记物(如吖啶酯)标记在一种抗体上,将淬灭剂或另一种能淬灭其活性的物质标记在竞争抗原或另一种抗体上。在未结合状态下,两者靠近,化学发光被淬灭或无法有效触发。当样本中的目标抗原与体系竞争结合,解除了这种淬灭效应,化学发光信号得以恢复。另一种策略是利用酶片段互补:将化学发光酶(如荧光素酶)分割成无活性的两个片段,分别标记在相互作用的分子对上,结合后酶活性恢复,催化底物发光。这些设计实现了在复杂样本中直接进行免疫定量。广西干式化学发光均相发光解决方案体外诊断行业新星,均相化学发光,助力企业快速发展!

离子通道和转运体是重要的药物靶点,但传统电生理方法通量极低。基于化学发光的离子敏炎症料或蛋白,为高通量筛选提供了可能。例如,使用对钙离子敏感的水母发光蛋白(Aequorin)或基于荧光素酶的钙指示剂(如Photina)。当离子通道开放引起离子内流时,会触发这些蛋白的化学发光反应。将稳定表达该报告系统和目标离子通道的细胞系用于筛选,加入化合物后直接测量发光信号变化,即可高通量地发现通道的激动剂或阻断剂。类似原理也可用于钠、钾等离子通道或某些转运体的功能研究。
评估疫苗免疫效果或康复者血清中和能力的关键是病毒中和抗体检测。传统的空斑减少中和试验(PRNT)耗时费力。基于假病毒系统的均相发光中和试验已成为高通量替代方案。将表达荧光素酶的报告基因包装进假病毒颗粒(携带目标病毒的囊膜蛋白)。当假病毒炎症细胞时,会驱动荧光素酶表达。如果样本中存在中和抗体,则会阻断炎症,导致荧光素酶信号下降。检测时只需在炎症后裂解细胞并加入发光底物,即可实现快速、定量、高通量的中和抗体滴度测定,在COVID-19等疫病中发挥了重要作用。均相化学发光技术的研发难点有哪些,如何攻克?

GPCR是比较大的药物靶点家族,其功能研究涉及配体结合、第二信使产生、下游信号通路活化等多个层面。均相发光技术多方面渗透于此领域。对于配体结合竞争实验,可采用TR-FRET,将受体标记供体,配体标记受体。对于GPCR活化后比较关键的cAMP积累或IP3/DAG产生,均有成熟的均相检测试剂盒。例如,cAMP检测常采用基于抗体竞争原理的均相发光免疫分析。细胞裂解后,内源性cAMP与加入的标记cAMP竞争结合有限量的抗cAMP抗体。抗体结合事件通过FRET或Alpha技术被检测,信号强度与内源性cAMP浓度成反比。这类方法直接在细胞裂解液中进行,快速、灵敏,完美契合GPCR激动剂/拮抗剂的高通量筛选。告别繁琐操作,均相化学发光来了!吉林均相发光
均相化学发光在心血管疾病诊断中的应用价值是什么?辽宁技术升级均相发光优点
均相发光是一种先进的生物化学检测技术,其关键特征在于整个检测反应过程均在均一的液相中进行,无需任何固相分离步骤(如洗涤、离心)。 它通过巧妙的设计,将待测物的特异性识别事件(如抗原-抗体结合、酶-底物反应)直接转化为可检测的光信号。 实现这一目标的关键在于依赖能量转移、空间位阻改变或化学环境变化等机制,使信号分子(供体)与淬灭分子(受体)或发光底物在结合事件发生前后,其相互作用效率发生明显改变,从而导致发光信号的增强或猝灭。与传统的异相免疫分析(如ELISA)相比,均相发光技术具有操作简便、通量高、易于自动化、试剂消耗少、检测速度快等突出优点,极大地推动了高通量药物筛选、临床诊断和基础生命科学研究的发展。辽宁技术升级均相发光优点
在临床诊断和生物研究中,经常需要同时检测一个样本中的多个指标。均相发光技术可以通过多种策略实现多重分析。空间编码:在不同的微孔或区域进行不同检测。光谱编码:使用发射不同波长荧光的多种受体(如不同镧系元素供体搭配不同颜色受体),通过检测不同波长通道的信号来区分不同靶标。时间编码:利用具有不同荧光寿命的供体。Alpha技术中也可以使用发射不同波长荧光的受体珠。这些多重均相检测方案能够在单次反应中获取更多信息,节省样本和试剂,提高检测效率。POCT市场新机遇,浦光干式均相化学发光助您把握未来!湖北均相发光的原理均相发光技术通过其“免分离”的关键设计理念,彻底变革了生物检测的模式。从基础的蛋白互作、酶...