本发明涉及生物医药领域，涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术：近年来，采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势，由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具，而只是使用普通的医用棉签，而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异，导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定，影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。
为规范口腔拭子DNA的采集，提高口腔拭子的DNA保存效率，亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。
口腔拭子超能的准确性和重复性是试剂采用**的热稳定性酶，灵敏度更高，保存稳定性更好！湖北鼻拭子口腔拭子厂家
美国ITW-TEXWIPE系列棉签。马来西亚Riverstone丁腈乳胶手套手指套，马来西亚各种乳胶手套，丁腈无硫手指套，产品远销全球各地，北京，天津，上海，南京，苏州，杭州，昆山，陕西，西安，武汉，湖北，南昌，赣州，江西，太原，山西，济南，烟台，山东，石家庄，河北，内蒙古，呼和浩特，昆明，云南，哈尔滨，黑龙江，吉林，长春，沈阳，辽宁，大连，合肥，安徽，河南，郑州，海口，海南，玉林，北海，广西，广东，广州，深圳，东莞，惠州，佛山，中山，珠海，茂名，河源，肇庆，中国香港，中国澳门，中国台湾，美国，泰国，新加坡，越南，日本，韩国，中东，欧美等地区。随着IT行业的迅速发展，华晨阳加强与国际同行交流，充分发挥企业的桥梁作用,严格按照ISO9000管理体系进行规范运作，生产的产品通过国内外检测机构认证。本着以〝质量至上求实创新,质量服务。辽宁咽拭子口腔拭子生产产家口腔拭子是一个形状长得跟牙刷很像的拭子。
本发明的特征在于：应用本发明的血液基因组DNA提取方法在10分钟内提取血液基因组可用于荧光PCR扩增检测，主要步骤如下。（1）将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液或者吸取100μL口腔拭子样本保存液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀。（2）将步骤（1）中得到的血液细胞沉淀中再加入200μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，至沉淀完全散开，然后5000g离心30s，弃上清。（口腔拭子样本则无需进行此步骤）。（3）向步骤（2）所获得的沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1～2min；室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的基因组DNA；所述的核酸释放剂组成为20mM～80mM的氢氧化钠溶液、～、～、～、～***钠、～3%甲酰胺；所述荧光PCR反应液组成为ROX、TaqMan探针、引物、dNTP、dUTP、UDG、BSA、聚合酶及缓冲液。附图说明图1为实例1检测的8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。图2～图5为实施例1提供的四份血液样本的三次平行实验的荧光扩增曲线图。图6为实施例2对比实例1提供的对8份血液样本平行实验的荧光扩增曲线图。具体实施方式为了使本领域技术领域人员更好地理解本申请中的技术方案。
加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。口腔拭子应该持续15s而不产生长久变形或者折断的现象。
深圳市华晨阳科技有限公司为中国香港晨阳国际集团旗下企业,本工厂专业生产经营：医疗器械（TOC取样拭子、***采样试子、DNA采样拭子、宫颈采样试子、咽喉采样试子、鼻腔采样拭子、妇女***采样刷、细胞保存液、细胞培养基、液基保存液、皮肤外用涂药器、微生物取样捧、阴道冲洗器.）工业净化产品：（无尘布、擦拭布/纸、净化棉签等）；我们隶属中国香港晨阳集团下属企业，在深圳有多个生产基地，产品设计医疗，生物制药，食品，工业，航空航天，电子科技等。通过ISO9001，ISO14001，ISO13485，CE，CFDA认证产品应用于：微生物，制药，医疗器材，医药，临床实验，诊断试剂，食品，微电子，光学，光电，磁盘，硬盘，半导体，晶圆，机电，实验室，研究所，汽车造船工业，航空航天领域等各个行业，覆盖范围广，主要产品有：采样拭子，清洁验证耗材，基因取样，***采样拭子棉签，等。 口腔拭子应该可以承受4N的垂直于轴向的静压力。辽宁咽拭子口腔拭子生产产家
然后把装有采集管的自封袋以及送检登记表常温送运输到公司。湖北鼻拭子口腔拭子厂家
口腔拭子介绍口腔拭子有很多种，比如植绒口腔拭子，聚酯纤维口腔拭子，尼龙口腔拭子，海绵口腔拭子，棉花口腔拭子，还有PVA口腔拭子，锯齿状口腔拭子，不同的口腔拭子有不同的作用，以及不同的采样方法，采集的细胞量也不同，都是用于口腔基因检测采样，分子诊断，细胞学，疾病学。口腔拭子产品用途：尼龙植绒拭子用途***，在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测，以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点：1.具有超常的吸水能力，可以将其表采集的标本数量由传统采样拭子的20%提高到了60%2.对收集到的标本有超过90%的释放率，从而确保了结果的高度可靠性3.针对不同的标本类型选用了不同的保存液4.塑料杆上有独特的可折断设计，方便标本运输5.环氧乙烷灭菌消毒，独立包装规格:CY-98000??CY-98000FS锯齿状口腔拭子包装：独立包装产地：中国深圳品牌：华晨阳/iCleanhcy生产商：深圳市华晨阳科技有限公司用途：基因检测采样，分子诊断，基因学，口腔学，细胞学，疾病学，实验室，研究所。法医，公安系统DNA。湖北鼻拭子口腔拭子厂家
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