湖南外泌体iTRAQ

各种细胞粘着分子在外泌体膜表面表达，由其决定外泌体被运输往哪一种细胞，期望开发利用该特征的新型DDS。外泌体在体液中十分稳定，同时外囊泡所含的蛋白质和RNA被外泌体的脂质双层膜所包被也不会分解。另外在从体液中提取外泌体后，体液可长期稳定保存，因此外泌体有望成为临床检测的新型疾病生物标记。外泌体与各种疾病的相关性被检测出，特别是血液中释放的病细胞来源的外泌体，其与正常细胞来源外泌体在结构分子上的差异倍受瞩目，并作为症状早期诊断技术，应用于与症状进展相关的研究。甚至人们期望将尿液中的外泌体作为肾脏、前列腺疾病、膀胱疾病的新型诊断标记，髓液中的外泌体作为脑内种瘤和神经退行性疾病的新型标记物。外泌体被工程化改造后，具有靶向特定细胞类型或组织的功能。湖南外泌体iTRAQ

外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，较后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。源自于间充质干细胞内分泌的外泌体，富含一百多种胞外基质蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生长因子。在临床上，干细胞外泌体主要治理烧伤、烫伤、皮肤溃疡，再生健康皮肤；在护肤方面，主要是对外伤受损、衰老中毒皮肤进行修复，比较全的调理皮肤、改善肤质，令肌肤恢复年轻、健康的状态。上海外泌体摄取泌体是细胞内源性的小囊泡，由大多数细胞分泌。

外泌体(exosomes)是一类由细胞分泌到胞外的囊泡。与其他两种胞外囊泡(微囊泡和凋亡小体)相比，外泌体在产生方式、尺寸、密度和内容物等方面存在明显差异。不同于微囊泡“出芽”的形成方式，外泌体主要通过胞吐过程释放至细胞外:首先细胞膜向内凹陷形成早期核内体(earlyendosomes)，早期核内体进一步内陷形成多泡体(multivesicularbodies，MVBs)，其中一部分多泡体与溶酶体(lysosome)融合，进而降解;另一部分与细胞膜融合，将其内部所包含的囊泡释放至胞外，即为外泌体。外泌体具有独特的物理化学性质，其直径为30～200nm，密度为1.13～1.19g/mL，组成包括细胞来源相关的脂质、蛋白质、RNA、DNA等物质，在其表面连接有大量的糖链，如甘露糖、聚乳糖胺和α2，6-唾液酸等。

利用蛋白质免疫印迹和酶联免疫吸附分析技术可以对外泌体标志性蛋白质进行定性定量分析。其中蛋白免疫印迹是外泌体的经典表征手段之一，操作时往往需要细胞裂解液作为阴性对照。常用的外泌体标志性蛋白质包括四跨膜蛋白质CD63、CD81、CD9、中流易感基因101蛋白(TSG101)、水通道蛋白2(AQP2，尿液中)和凋亡诱导因子6相互作用蛋白(Alix)等，内参蛋白质可以是肌动蛋白(βActin)或甘油醛－3-磷酸脱氢酶，阴性对照蛋白可以是阻抑素(PHB，线粒体标志蛋白)或钙联结蛋白Calnexin。在酶联免疫吸附析法中，外泌体裂解液通过固载有抗体的固相基质，随后与检测抗体共孵育。两种方法均存在操作繁琐、耗时长的问题，相比较而言，酶联免疫吸附分析法比蛋白质免疫印迹法更加快速，适用于高通量分析。外泌体的异质性决定了外泌体药物递送系统要根据所传递治理物质的类型、目标组织的特点等进行针对性的调整。

膜封闭的囊泡释放到周围环境中已经成为近几年来越来越受关注的问题。令人信服的证据表明囊泡可交换复杂的信息有助于这种兴趣的兴起。但是，也已经清楚，不同类型的分泌囊泡共存，具有不同的细胞内起源和形成模式，因此可能具有不同的组成和功能。外泌体是分泌囊泡的一种亚型。它们在真核细胞内的多泡小体中形成，并且当这些多泡小体与质膜融合时分泌到细胞外。有趣的是，不同的分子家族已被证明参与细胞内形成外泌体及其随后的分泌，这表明即使在外泌体中也存在不同的亚型。外泌体作为核酸分子的药物载体主要用于基因治理。湖南外泌体iTRAQ

外泌体在体液中十分稳定，同时外囊泡所含的蛋白质和RNA被外泌体的脂质双层膜所包被也不会分解。湖南外泌体iTRAQ

外泌体(exosome)是多种活细胞经过“内吞–融合–外排”等一系列过程主动向胞外分泌的直径为30~150nm的双层膜结构细胞外囊泡(extracellularvesicles,EVs),广fan存在于血液、尿液和唾液等生物体液中,并通常作为细胞间胞质蛋白、核酸和脂质的转移载体发挥运输调控作用,被认为是细胞间通讯的核xin部分。外泌体于1983年在HARDING等和PAN等研究羊网织红细胞分化的过程中被发现,并于1996年由RAPOSO等证实能够作为一种细胞间通讯结构在免疫系统中发挥作用后得到了广fan关注。近年来,随着外泌体在中流、心血管和感ran性疾病等多种疾病形成中的生物学作用和功能被逐渐揭示,尤其是2015年MELO等发现,外泌体Glypican-1蛋白可有效区分慢性胰腺炎与胰腺ai以来,外泌体作为疾病诊断、预后预测标志物以及药物靶向zhiliao载体的转化医学应用也得到了迅速的推进。湖南外泌体iTRAQ