江苏外泌体脂质组学

外泌体中存在着某些特定的蛋白质、脂质和多糖,基于抗原–抗体特异性识别和结合作用原理,可将外泌体从其他组分中分离出来。四次跨膜蛋白家族、脂膜、膜联蛋白、上皮细胞黏附分子或肝素等都可以作为抗原,而捕获外泌体的抗体可以附着在平板、磁珠、二氧化硅、树脂、膜亲和过滤器、纤维素滤膜、聚酰氨基胺树状聚合物表面和微流控器件上。常用方法有酶联免疫吸附法和磁珠法等。酶联免疫吸附法使用聚苯乙烯微孔板作为抗体附着介质,其结果用吸光度值表示,该方法可以快速分析已知表面生物标志物的表达,也可以瞬时读出外泌体的产量和特异性。磁珠法多使用共价包覆链霉亲和素的磁珠,与样品一起孵育后可通过磁泳将被结合的外泌体从样品组分中分离出来。鉴于微米级磁珠可赋予更大的接触面积,该方法不jin具有高度特异性,还具有比超速离心更高的外泌体产率。外泌体不只可作为疾病诊断的生物标志，而且可作为天然的药物传递载体。江苏外泌体脂质组学

间充质干细胞存在于骨髓、脂肪、脐血、牙髓、滑膜液等部位，是一种能够自我更新的多功能干细胞。间充质干细胞通过旁分泌的形式发挥其生理功能，而外泌体作为一种细胞间传递信息的介质，在间充质干细胞的功能行使中发挥了重要作用。研究发现间充质干细胞来源的外泌体能够修复组织损伤、抑制中流生长和调节免疫响应，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿尔兹海默症等疾病的潜力。另外，也有研究显示间充质干细胞来源的外泌体会促进某些中流生长。体液外泌体提取试剂盒服务外泌体可由间充质干细胞、淋巴细胞和肿细胞细胞等多种类型细胞主动分泌释放。

通过对28例前列腺ai症患者和19例正常人尿液外泌体中的miRNA进行深度测序分析，发现两种miRNA(miR-196a-5p和miR-501-3p)在前列腺ai患者组明显下调，表明尿液外泌体中的特异性miRNA可能作为前列腺ai的新型生物标志物。Khurana等［100］将研究对象由miRNAs扩大至多种类型RNA，通过对慢性肾病患者尿液外泌体中各类RNA进行系统研究，在慢性肾病患者组中识别出30种明显差异的lncRNAs，表明尿液外泌体中的lncRNAs具有作为慢性肾病早期诊断标志物的潜力。Skotland等的研究则表明尿液外泌体中的脂质能够作为前列腺ai的新型标志物，3种脂质标志物结合使用能够有效提高对前列腺ai的诊断灵敏度(93%)和特异性(100%)。

Buller等利用miR-146b的质粒转染间充质干细胞，使其分泌的外泌体负载miR-146b，并将外泌体注射至移植到小鼠体内的GBM处。结果表明，这种利用外泌体运输miRNA进行zhiliao的方法可以有效抑制中流的生长。对于GBM类脑部中流，体内zhiliao不同于体外细胞实验，更需考虑脑部组织微环境对药物的影响，外泌体可运输miRNA并不破坏其在脑部中流组织处的原本功效。然而，至今还没有利用外泌体载药经静脉注射zhiliaoGBM的报道，这主要是由于跨越血脑屏障(BBB)仍然是外泌体进行脑部中流zhiliao需要解决的难题。尽管如此，Wood等报道的在进行阿兹茨海默病zhiliao时利用对脑部神经元特异性肽RVG靶向的外泌体穿过BBB的研究显示了经靶向修饰的外泌体具备穿过BBB的潜力，因此外泌体载药zhiliao具有广阔的前景。外泌体被工程化改造后，具有靶向特定细胞类型或组织的功能。

外泌体的提取方法：超速离心法，这是外泌体提取比较常用的方法。超速离心法得到的外泌的体量比较多，但是纯度不足，电镜鉴定时发现外泌体聚集成块，由于微泡和外泌体没有非常统一的鉴定标准，也有一些研究认为此种方法得到的是微泡而不是外泌体。过滤离心法，这种操作简单、省时，不会影响外泌体的生物活性，但同样存在纯度不足的问题。密度梯度离心法，用此种方法分离到的外泌体纯度高，但是前期的准备工作繁杂，比较耗时，量少。从体液和培养上清中高纯度提取的高纯度外泌体，在活内是否真的能发生作用尚未能确定。血浆外泌体提取方法

外泌体可以作为“天然的纳米粒子”来进行药物递送。江苏外泌体脂质组学

外泌体（Exosome）是一种直径为30-100nm的纳米级脂质包裹体结构，内部包裹了蛋白、mRNA和microRNA等物质。外泌体由细胞分泌释放出来，在血液等体液内传播，较后又可被其他细胞吞噬，是细胞间通讯的重要介质。源自于间充质干细胞内分泌的外泌体，富含一百多种胞外基质蛋白，mRNA信使核糖核酸和多重生长因子。在临床上，干细胞外泌体主要治理烧伤、烫伤、皮肤溃疡，再生健康皮肤；在护肤方面，主要是对外伤受损、衰老中毒皮肤进行修复，比较全的调理皮肤、改善肤质，令肌肤恢复年轻、健康的状态。江苏外泌体脂质组学

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