本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 口腔拭子的优点是将产品进行环氧乙烷灭菌。四川医用口腔拭子厂家
⑴尼龙植绒拭子。（用于采样，释放量高达90%以上）
产品特点：
①采用国际通用的方便***的纸塑包装。
②γ射线***，确保无菌。
③大包装盒内的每套独立包装，方便使用。
④针对不同的标本类型选用了不同的保存液。采样管（细菌、***、支原体、衣原体）
产品优势：
1、采集拭子特点：采集系统采用尼龙植绒拭子，对微生物***害，能程度的增加标本的采集及释放量。深圳市华晨阳科技有限公司，大量临床实验表明：与普通无菌棉拭子相比，尼龙植绒拭子有着更好的对临床微生物标本的采集与运送效果.尤其是对于那些不能及时送检、放置时间过长的标本而言更是如此。
拭子的优势：
①独有的喷射式植入尼龙纤维技术，增加标本的采集及释放量。
②拭子全长，塑料杆上有独特的可折断设计。
③绒毛质地可采集更多目标分析物
④没有标本残量，加快标本过程处理。
⑤拭子为***独立包装。独立包装的无菌拭子尼龙植绒拭子已经具有远超传统拭子的优越性能。由于其具有超常的吸水能力，可以将其表采集的微生物的恢复率由传统的20%高到了60%由于对收集到的微生物有超过90%的释放率，取样拭子确保了结果的高度可靠性。这一产品标志着一个重大的突破，因为它是市场上的个可以用于环境控制定量分析的拭子。 四川医用口腔拭子厂家这款口腔拭子用起来超级便捷：**一体化设计，更容易操作。
本发明涉及生物医药领域，涉及一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。背景技术：近年来，采用口腔拭子进行DNA检验有逐渐增多的趋势，由于国内没有专门用于采集口腔脱落细胞的工具，而只是使用普通的医用棉签，而不同的人采集口腔脱落细胞在擦拭次数、力度、检材剪取量及扩增用的模板量上都存在一定差异，导致了口腔拭子的DNA常温下保存效果不大稳定，影响了口腔拭子在DNA常温下保存中的应用。
为规范口腔拭子DNA的采集，提高口腔拭子的DNA保存效率，亟需一种常温下长时间口腔拭子DNA保存和提取方法。
口腔NACY-98000A研制出一种利用吸水海绵从唾液中采集DNA的产品。这是一种一体式的系统更新可以实现采集、稳定、运输以及提纯来自于唾液的DNA。无痛，非侵入性的样品采集。样品中的DNA在常温下可稳定保存数年之久，采集质量高。深圳市华晨阳科技有限公司，高产量的DNA，经证实适用于多种下游应用中Bio Banking的理想之选，采集、提取系统化操作，节省您的实验成本CY-98000A DNA唾液采集器(型号OCR-100)采集1mL唾液样本于试管中并混合**稳定液体，提供辅助采集，唾液样本室温下可稳定保存数月时间，口腔拭子口腔拭子提取到的DNA可用于您的各类基因分析及检测。DNA Genotek研制出一种利用吸水海绵从唾液中采集DNA的产品。这是一种一体式的系统更新可以实现采集、稳定、运输以及提纯来自于唾液的DNA。简单无痛地采集口腔DNA样本可采用平邮的方式安全运输；可以自己、或在别人的帮助下在家中或医院中使用拭子；唾液样本室温下可稳定保存1年时间，提取到的微生物DNA可用做各类就疾病分析及检测。 口腔拭子的采样头端的凹陷处折断力大小应该不小于2N。
下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 这款口腔拭子拥有新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作。四川医用口腔拭子厂家
口腔拭子取样**0分钟，不要吃东西，吸YAN，饮酒等。四川医用口腔拭子厂家
加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。四川医用口腔拭子厂家
深圳市华晨阳科技有限公司是一家致力于核酸检测、分子诊断、医学检验、病毒检测等产品研发、生产、销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有二十多项**，部分专利已经转化应用于市场。产品主要应用于基因检测、医疗机构、生物制药、大型甲等医院、出入境检验检疫、诊断试剂、疾控机构、刑侦法医鉴定等。近年来，公司不断加大自主研发投入，积极引进人才和技术，并与国内外多家科研机构、医学检验所以及三甲医院、基因检测公司、疾病预防控制中心等科研机构有着紧密合作，促进人类健康产业大发展。
