俄罗斯非洲猪瘟解决方案

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。 非洲猪瘟弱毒活疫苗虽然在实验室条件下攻毒表现出保护，但是临床使用存在毒力返强，与野毒株重组的风险。俄罗斯非洲猪瘟解决方案

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟弱毒株阳性场的其它管理细节如下：1、禁止料槽清余料，阳性猪淘汰赶离后，禁止料槽清料，但每次消毒都要不进栏消毒清空的栏舍，包含料槽、栏杆。2、停止清粪、严禁用高压水枪冲洗猪圈，阳性栏舍的猪清理后，用3%烧碱消毒（原位消毒），然后退出后不得再进入。同单元其它栏舍也禁止人员进入，停止所有栏舍清粪，严禁用高压水枪冲洗猪圈。只能在走道采用雾化带猪消毒及对空栏消毒。3、密封清空的猪圈风机口等，防止病毒的扩散，为保护全场其它栋舍猪只安全，清空的猪栏风机口、门窗、水帘、密封，暂不做清洗，禁止人员进入，阳性猪舍的工具不得外移。俄罗斯母猪非洲猪瘟消毒机构2018年非洲猪瘟病毒传入中国，从北方到南方迅速蔓延，在34个省、自治区均有报道，给猪业带来巨大影响。

非洲猪瘟病毒的初级复制发生在离病毒进入点相近的淋巴结的单核细胞和巨噬细胞中。因此，在经口或口鼻暴露的情况下，扁桃体和下颌淋巴结的单核细胞和巨噬细胞首先受累。随后，病毒通过血液和/或淋巴系统传播到次级复制位点，如淋巴结、骨髓、脾脏、肺、肝和肾。大多数非洲猪瘟病毒分离株与红细胞膜结合，并在阳性猪中引起红细胞吸附。然而，一些分离株不诱导红细胞吸附。虽然非洲猪瘟病毒主要在髓单核细胞中复制，但它也在内皮细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞和中性粒细胞中复制。普遍认为，髓单核细胞的损坏是非洲猪瘟发病机制的关键因素。此外，非洲猪瘟病毒通过调节宿主细胞因子引起免疫抑制，导致过度的组织炎症和细胞凋亡。此外，髓样细胞的破坏导致细胞成分（即危险信号）的释放。当单核细胞/巨噬细胞被侵害时，它们分泌多种介质，包括促炎细胞因子，如白细胞介素-1、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。这些细胞因子能够触发急性期反应、炎症、内皮细胞受损和细胞凋亡。TNF-α起关键作用，因为它能够诱导血管舒张和通透性增加并调节血管内皮细胞的受损状态（促凝/抗凝）。此外，TNF-α参与细胞凋亡的调节。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，非洲猪瘟入侵后精细防控的采样方案如下：1、猪舍内部环境，生产人员着防疫服、防疫帽、手套换鞋进入猪舍后，先采样，风机口、开关、料槽、栏杆、猪栏隔离墙内侧近地面、水嘴、窗户、工具手柄等；2、人员：阳性栋和高风险栋舍的人员，每天坚持采样。工作完成后，在洗澡前，饲养人员采集个人样（手、面部、膝部、头发、鞋底、眼镜、手机等），主要监控检测是否存在有病毒被携带传播的风险；3、异常猪只：不吃料或者半吃料、精神呆滞、呕吐、拉稀、便血。采样为：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；4、高风险猪群：母猪（定位栏、产房）采用“红白灰”三根棉签法：内环境样（脏棉签）+深咽拭子（白棉签）+尾根血（红棉签）；“安全第一、能采尽采”原则，咽拭子采集困难的母猪可以放弃，确保安全操作。保育或育肥猪：棉绳（唾液）+环境样；非洲猪瘟重组蛋白疫苗，一般会选择8~10能产生具有保护性抗体的蛋白组成。

非洲猪瘟疫苗研发历程艰难，主要在于缺乏明确的保护相关物、抗体的中和能力有限以及病毒的复杂性，都导致了开发有效疫苗的挑战。

多年的研究努力在非洲猪瘟病毒疫苗开发方面取得了有希望的进展，但商业化的疫苗仍未普及，并且报告了当前疫苗在田间使用后出现问题，例如在越南。基于康复动物的血清学有良好的反应，学者们将重组的靶向结构蛋白（如p30、p54、p72、pp62和CD2v）疫苗、DNA疫苗和病毒载体疫苗等作为非洲猪瘟病毒疫苗开发的重点。许多项目利用计算机预测的抗原通过各种载体系统表达，但大多数方法显示出极小或无保护效力。

近期，一种包含8种非洲猪瘟病毒抗原的组合，通过复制缺陷型人腺病毒5（初免）和改良痘苗病毒安卡拉株（加强）给药，在非洲猪瘟病毒基因型I攻毒后保护猪免于死亡。该研究方法在抗原选择方面具有前景，并支持DIVA兼容的亚单位疫苗可提供一定程度保护的概念。不幸的是，未识别出明确的保护指标，因为所有动物都发病并表现出病毒血症。此外，尝试用基因型II毒株攻读复制这些结果未成功。因此，仍然缺乏有说服力的载体或亚单位疫苗候选株。 规模化猪场从2020年开始配备实验室，开展非洲猪瘟病毒的自检，至2023年底，这一比例已达到90%。新加坡养猪场非洲猪瘟检测

八方同创总结：很多常用消毒剂对非洲猪瘟病毒有效，如3%烧碱戊二醛、过硫酸氢钾、二氯异氰尿酸钠等有效。俄罗斯非洲猪瘟解决方案

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，近期的研究再次表明，ASFV在4℃、22℃和40℃时稳定，在EMEM中培养24h后，损失不到10个50%血细胞吸附剂量（HAD50）/mL。组织中的ASFV可以在深度冷冻（-70℃）条件下存活多年而没有明显的滴度损失，但在20℃时会逐渐失去活性，但仍可存活至少105周。在4℃时，病毒在培养基中非常稳定，至少在61周内保持活性。在较高温度下，ASFV失活相对较快，在37℃下，ASFV在细胞培养基中可保持活性11~22d，但在50℃时，只有少部分病毒保持活性，而在60℃时，15min后就检测不到活毒粒子。俄罗斯非洲猪瘟解决方案

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